【摘 要】
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目的:通过体内和体外实验观察小鼠巨细胞病毒(Murine cytomegalovirus,MCMV)早期感染对小鼠脾脏CD3+T、γδT和NK细胞亚群和功能变化的影响。方法:分别用 5×104 PFU 和 5×1
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目的:通过体内和体外实验观察小鼠巨细胞病毒(Murine cytomegalovirus,MCMV)早期感染对小鼠脾脏CD3+T、γδT和NK细胞亚群和功能变化的影响。方法:分别用 5×104 PFU 和 5×105 PFU 滴度的 MCMV Smith MSGV株感染C57BL/6小鼠9天,提取脾脏淋巴细胞。提取C57BL/6小鼠脾脏淋巴细胞,在体外分别用1×104 PFU、1×105 PFU和1×106 PFU滴度MCMV感染24 h和48 h。多色流式细胞术检测脾脏CD8+/CD4+T、γδT和NK细胞分泌细胞因子(IFN-γ、IL-2、TNF-α)和表达颗粒酶B、CD107a 的水平,及 NK1.1+CD49b+CD3-NK 细胞亚群(CD11b-KLRG1-,CD11b+KLRG1-,CD11b+KLRG1+)的变化。用五聚体检测MCMV特异性 CTL(CD3+CD8+Pentamer+)。结果:与对照组比较,MCMV体内感染小鼠后,CD8+T细胞分泌的IFN-γ、IL-2和表达的颗粒酶B,γδT细胞表达的颗粒酶B、CD107a水平,及CD25+CD4+T细胞数量显著增加;5×105PFU感染组CD25+CD4+T细胞数较5×104 PFU感染组低,其余不同感染组之间无统计学差异;体内感染后MCMV特异性CTL比例较对照组也增加,但不同病毒滴度感染组间无差异;MCMV体内感染小鼠后CD11b-KLRG1-NK细胞数较对照组减少,但CD11b+KLRG1+ NK细胞明显增加,不同病毒滴度间无统计学差异。不同病毒滴度MCMV体外感染24 h和48h后,CD8+ T细胞的活化表面分子CD69均比对照组增加,且感染48 h后1 × 1 06 PFU组CD69表达水平高于1 × 1 04 PFU、1 × 1 05 PFU感染组;体外感染24h,CD4+T细胞表达的CD69较对照组增加,且有1×105 PFU、1×106 PFU感染组高于1×104 PFU感染组;体外MCMV感染24 h后,1 × 1 06 PFU感染组CD8+ T细胞分泌的IFN-y较对照组、1×104 PFU和1×105 PFU感染组增加;体外感染24 h和48 h后各感染组分泌的TNF-α均较对照组增加,且随病毒滴度升高TNF-α分泌增加;体外感染24h后CD4+T细胞分泌的TNF-α较对照组增加,感染48 h后1×106 PFU感染组高于对照组和其他两感染组;CD8+T细胞和CD4+T细胞各组间IL-2分泌和颗粒酶表达未见明显差异;与对照组相比,体外感染24 h和48 h后各感染组均可见NK细胞IL-2和颗粒酶B水平升高,且均有1×106 PFU感染组IL-2和颗粒酶B表达和分泌水平高于其他感染组。结论:MCMV早期感染后CD8+ T、γδT和NK细胞功能可能较前增强。
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