【摘 要】
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草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(J.E.Smith)是一种源自美洲的世界性重大农业害虫,2019年入侵我国云南省后迅速在全国蔓延,对我国农业生产造成极大的威胁。化学防治是防控害虫的主要措施,但由于药剂的不合理使用,致使草地贪夜蛾对多个杀虫剂的敏感性下降。四氯虫酰胺是一种新型双酰胺类杀虫剂,可有效防治多种害虫,被农业农村部推荐用于草地贪夜蛾的应急防控,2021年已报道我国草地贪
【基金项目】
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湖北省农业科技创新行动项目(NYKJ2019011); 湖北省技术创新专项重大项目“草地贪夜蛾高效低风险化学防控关键技术及产品研发(2020BBA051)”;
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草地贪夜蛾Spodoptera frugiperda(J.E.Smith)是一种源自美洲的世界性重大农业害虫,2019年入侵我国云南省后迅速在全国蔓延,对我国农业生产造成极大的威胁。化学防治是防控害虫的主要措施,但由于药剂的不合理使用,致使草地贪夜蛾对多个杀虫剂的敏感性下降。四氯虫酰胺是一种新型双酰胺类杀虫剂,可有效防治多种害虫,被农业农村部推荐用于草地贪夜蛾的应急防控,2021年已报道我国草地贪夜蛾田间种群对双酰胺类杀虫剂氯虫苯甲酰胺产生27.8倍的抗性,因此有必要探究草地贪夜蛾田间种群对四氯虫酰胺的敏感性及抗性风险。基于此,本研究从2020-2021连续2年监测了多个地区草地贪夜蛾田间种群对四氯虫酰胺的抗性水平,进一步通过室内抗性选育明确草地贪夜蛾对四氯虫酰胺的抗性风险和四氯虫酰胺短期胁迫对草地贪夜蛾P450基因表达的影响。主要研究结果如下:1.草地贪夜蛾田间种群对四氯虫酰胺的抗性监测2020-2021年,采用饲料表面涂药法监测了我国云南省和湖北省多个地区的17个草地贪夜蛾田间种群对四氯虫酰胺的抗性水平。结果表明,四氯虫酰胺对草地贪夜蛾田间种群的LC50值在12.91 mg/L-85.44 mg/L之间,相比于最敏感的湖北武汉种群(2021-WH),有3个田间种群(2020-XT、2021-JZ和2021-ZG)对四氯虫酰胺产生了低水平抗性,最高抗性倍数达6.62倍,其他14个田间种群对四氯虫酰胺表现为敏感,而2021年的湖北武穴种群(2021-WX)、湖北荆州种群(2021-JZ)和湖北秭归种群(2021-ZG)对四氯虫酰胺的敏感性有所下降,变异倍数分别为1.81倍、2.73倍和2.07倍,表明草地贪夜蛾田间种群对四氯虫酰胺存在抗性上升的风险。2.草地贪夜蛾对四氯虫酰胺的抗性风险评估利用饲料表面涂药法对草地贪夜蛾进行了连续13代的抗性筛选,筛选13代后草地贪夜蛾对四氯虫酰胺的抗性倍数为7.45倍,为低水平抗性。对草地贪夜蛾对四氯虫酰胺抗性风险进行评估,其抗性现实遗传力h~2为0.13(前10代),表明草地贪夜蛾对四氯虫酰胺产生抗性的风险,四氯虫酰胺可作为防控草地贪夜蛾较理想的杀虫剂。3.四氯虫酰胺短期胁迫对草地贪夜蛾P450基因表达的影响以LC25、LC50浓度的四氯虫酰胺处理草地贪夜蛾3龄幼虫24 h、48 h和72h后,利用q RT-PCR检测P450基因的表达水平。结果表明,两个剂量胁迫处理24 h、48 h和72 h后,CYP9A59、CYP9A58、CYP9A26、CYP9A30、CYP9A31和CYP321A9均显著上调表达,说明其可能参与草地贪夜蛾对四氯虫酰胺的解毒代谢。进一步利用荧光定量PCR分析CYP9A59等基因在草地贪夜蛾不同组织、不同龄期的表达水平,发现CYP9A59等基因在中肠与蛹中均高表达。进一步选取CYP9A59进行RNAi试验,结果表明,注射ds CYP9A59能够显著抑制CYP9A59的表达,同时导致草地贪夜蛾对四氯虫酰胺的敏感性显著上升,说明CYP9A59可能参与草地贪夜蛾对四氯虫酰胺的解毒代谢。以上研究为揭示草地贪夜蛾对双酰胺类杀虫剂四氯虫酰胺的敏感性现状及代谢抗性机理提供了重要的理论依据。
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