基于生色及功能化核酸的痕量铜、银检测方法研究

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随着城市工业化的快速发展,重金属污染引发的问题日趋显露。重金属是一种具有高毒性的污染物,会对生物系统造成长期的损害,它干扰细胞内生化反应,导致明显的氧化损伤,甚至有些为致癌物质。因此,为应对全球污染,寻求简单、快速重金属离子定性定量检测技术显得愈发重要。本文的主要工作是建立了新的金属离子检测体系,利用紫外及荧光光度法完成对水样中重金属Cu2+、Ag+的检测,主要研究内容如下:1.由于Cu2+能与联苯胺反应生成不溶于水的蓝紫色沉淀,加入α-萘酚后沉淀逐渐溶解,溶液的颜色由无色转为暗红色,导致体系的紫外吸收光谱发生明显的变化,据此建立了利用生色反应测定铜的新方法。Cu2+与显色剂在波长488nm处有最大吸收,Cu2+在0.3-50μg/L范围内遵守比尔定律,回归方程为y=0.2981x+0.0296(mg/L),R=0.9964,从回归方程可算出摩尔吸光系数ε=3.8×103L/mol·cm。此法灵敏度好,对实际样品中微量铜离子的检测,与原子吸收法相比较,相对误差≤±2%(n=8)。2.利用Ag+与DNA中胞嘧啶(C)结合的高度特异性和单壁碳纳米管(SWNTs)对单双链不同的特性,设计了一种简便灵敏的Ag+检测方法。SWNTs能与单链DNA(C20)和荧光染料Evagreen (EG)形成复合物,这时溶液中背景信号低,当加入Ag+后,C20能通过C-Ag+-C键形成EG能够嵌入的折叠结构,加入Ag+后溶液的荧光值增强。实验考察了pH、荧光染料的用量、其他金属离子干扰等因素的影响。实验中发现,Ag+的含量在0.05-700nM范围内与吸收光度呈线性关系,线性相关系数为0.9953,检出限为7.4nM。Hg2+、Fe3+等其它金属离子无明显干扰,用于环境水样中Ag+的测定,相对误差≤±3%(n=5),加标回收率为94.32-106.25%。
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