人参内生细菌ge15抑菌机理及病害防治效果评价研究

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人参(Panax ginseng C. A. Meyer)为五加科人参属药用植物,素有“百草之王”的美誉,主要分布在我国东北长白山麓。目前,市场上流通的人参主要依赖人工栽培,野生变栽培后土传根病逐年加重,导致人参产量及品质降低,化学防治带来的农药残留问题使人参产业蒙受巨大的经济损失。内生细菌生存环境相对稳定,如果从中发现生防菌株,将有助于解决传统病害防治存在的农药残留、病菌抗(耐)药性以及防效不稳定等问题。本研究从人参体内分离筛选出对人参病原菌具有抑菌效果的内生细菌,对其进行分子生物学和微观形态学鉴定,确定其种属及其生物学特性;通过室内试验,研究拮抗菌株的抑菌机理;通过田间试验,研究拮抗菌株在田间的防治效果,为生防制剂的开发奠定的理论基础。1.从二年生的健康人参分离得到40株内生细菌,并从中筛选出对人参病原菌有抑制作用的内生细菌ge15。经16SrDNA同源性分析和显微观察,初步鉴定ge15属于窄食单胞菌属(Stenotrophomonas sp.),对其进行生理生化特性测定发现与Stenotrophomonas rhizophila的亲缘关系最近。内生菌株ge15与人参病原菌对峙培养中,产生明显的抑菌圈,其对病原菌的抑菌效果明显。2.人参病原菌与ge15菌株对峙培养,通过显微观察发现病原菌菌丝与对照组相比出现扭曲畸形生长,产孢量明显下降且不能正常萌发;ge15菌株发酵液上清液对病原菌有明显抑制作用,对上清液中活性物质进行粗提取,发现蛋白粗提取物、脂肽粗提物以及有机溶剂提取的小分子代谢物均具有不同程度的拮抗效果,说明ge15胞外分泌液中的抑菌活性成分并不单一,可能是多种活性物质协同起抗菌作用。3.田间施用ge15的抗生素标记菌株显示,拮抗菌株能够较稳定的在人参体内和根际土壤中定殖,且回收菌株对病原菌仍然具有较好的抑制效果;ge15菌株发酵液的田间防病效果与多菌灵相当,人参的出苗率和存苗率明显高于对照组,并且ge15对于人参种子和幼苗生长没有明显的影响。
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