论文部分内容阅读
[目的]本课题拟探讨钙网蛋白在鼻咽癌组织中的表达,并进一步研究其对鼻咽癌细胞EMT的影响。[方法]1.采用免疫组化方法检测钙网蛋白(Calreticulin)在鼻咽癌组织中的表达情况,并分析其表达的临床意义;2.构建pcDNA3.1(+)/Calreticulin真核表达载体,采用阳离子脂质体瞬时转染鼻咽癌CNE2细胞(以pcDNA3.1(+)载体为对照),通过Western blot检测CNE2细胞中Calreticulin的表达;3.光镜观察Calreticulin高表达对CNE2细胞形态的影响,利用迁移侵袭实验检测Calreticulin高表达对CNE2细胞迁移侵袭能力的影响;4.选用Western blot检测转染后鼻咽癌CNE2细胞中EMT相关蛋白Vimentin、MMP-9、TGF-β以及E-cad的表达情况。[结果]1.Calreticulin在鼻咽癌组织中的阳性表达率为82.69%(43/52),鼻咽部良性病变组织为19.29%(11/57),Calreticulin在鼻咽癌组织中表达显著增高(P<0.05);Calreticulin的表达率与鼻咽癌分期及淋巴结转移呈正相关(r=0.457、r=0.382,P<0.05)。2.转染后鼻咽癌CNE2细胞中Calreticulin表达明显升高,CNE2细胞的形态由扁平、鹅卵石样上皮形态,逐渐演变为长梭形、纤维细胞样形态,呈现典型的EMT现象,且CNE2细胞的迁移侵袭能力较对照组明显增强(P<0.05)。3.Western blot检测结果显示,Calreticulin在CNE2细胞中表达升高后,细胞中E-cad表达显著降低(P<0.05)。而Vimentin、MMP-9、TGF-β三种蛋白的表达则显著升高(P<0.05)。结果提示,Calreticulin表达升高能够促进鼻咽癌CNE2细胞发生EMT,增强鼻咽癌CNE2细胞的迁移及侵袭能力。[结论]Calreticulin在鼻咽癌组织中表达显著增高,与鼻咽癌分期及淋巴结转移呈正相关;Calreticulin可促进鼻咽癌CNE2细胞发生EMT,增强鼻咽癌细胞的迁移和侵袭能力。