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目的:确定新型中药原料药——参草菌质的最佳发酵工艺并探讨其对大鼠心肌纤维化的抑制作用及机制研究方法:一、以人参为基质,虫草菌为发酵菌株进行双向固体发酵,构建人参虫草新型发酵组合。通过粒度、生长因子、温度、相对湿度,接种量,培养时间等参数控制,跟踪人参稀有皂苷、虫草素等功效成分含量指标优选最佳工艺条件。二、通过一次性大剂量注射异丙肾上腺素建立大鼠心肌纤维化模型,观察参草菌质对大鼠心肌纤维化的影响并探讨相关机制。三、通过血管紧张素Ⅱ刺激建立心肌成纤维细胞过度增殖模型,观察参草菌质对心肌成纤维细胞过度增殖的影响并探讨相关机制。结果:一、从酶分子水平进行参草菌质生物转化机理研究,并从虫草菌中分离得到一种分子量为16KDa的β-葡萄糖苷酶,该酶能在36h内转化人参皂苷Rb1,转化率为97.7%。二、体内实验:1.与空白对照组比较,心肌纤维化组大鼠SBP、DBP、MAP、LVSP、±dp/dtmax均明显降低,而HR、LVEDP则明显升高,差异有统计学意义;与心肌纤维化组比较,参草菌质组大鼠SBP、DBP、MAP、LVSP、±dp/dtmax升高,HR、LVEDP降低,差异有统计学意义。2.与空白对照组比较,心肌纤维化组大鼠心室脏器系数明显增加,差异有统计学意义;与心肌纤维化组比较,参草菌质组大鼠心室脏器系数明显降低,差异有统计学意义。3.与空白对照组相比,心肌纤维化组大鼠血清CK、CKMB、GOT和LDH活性增加,差异有统计学意义;与心肌纤维化组比较,参草菌质组大鼠血清CK、CKMB、GOT和LDH活性降低,差异有统计学意义。4.与空白对照组相比,心肌纤维化组大鼠血清MDA含量增加、SOD及GSH-Px活性降低,差异有统计学意义;与心肌纤维化组比较,心肌纤维化组大鼠血清MDA含量减少、SOD及GSH-Px活性升高,差异有统计学意义。5.与空白对照组相比,心肌纤维化组大鼠血浆及心肌组织AngⅡ、ALD含量增加,差异有统计学意义;与心肌纤维化组比较,参草菌质组大鼠血浆及心肌组织AngⅡ、ALD含量降低,差异有统计学意义。6.与空白对照组相比,心肌纤维化组大鼠Ⅰ型胶原/Ⅲ型胶原光密度比值升高,差异有统计学意义;与心肌纤维化组比较,参草菌质组大鼠Ⅰ型胶原/Ⅲ型胶原光密度比值降低,差异有统计学意义。7.参草菌质能减轻心肌纤维化大鼠心肌组织病理学损伤。8.与空白对照组相比,心肌纤维化组大鼠心肌组织TGF-β1/Smad2蛋白表达明显增强;与心肌纤维化组相比,参草菌质组大鼠心肌组织TGF-β1/Smad2蛋白表达减弱。三、体外实验:1.参草菌质1000、1200μg·L-1抑制正常心肌成纤维细胞的存活率,差异有统计学意义,其它剂量组对正常心肌成纤维细胞的存活率无影响。2.与空白对照组相比,血管紧张素Ⅱ组心肌成纤维细胞DNA合成增加,差异有统计学意义;与血管紧张素Ⅱ组相比,参草菌质200μg·mL-1、400μg·mL-1组心肌成纤维细胞DNA合成减少,差异有统计学意义。3.与空白对照组相比,血管紧张素Ⅱ组心肌成纤维细胞上清中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的含量明显增加,差异有统计学意义;与血管紧张素Ⅱ组相比,参草菌质200μg·mL-1、400μg·mL-1组心肌成纤维细胞上清中Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原的含量明显减少,差异有统计学意义。4.与空白对照组相比,血管紧张素Ⅱ组心肌成纤维细胞上清中CTGF、TGF-β1的含量明显增加,差异有统计学意义;与血管紧张素Ⅱ组相比,参草菌质200μg mL-1、400μg·mL-1组心肌成纤维细胞上清中CTGF、TGF-β1的含量明显减少,差异有统计学意义。5.与空白对照组相比,血管紧张素Ⅱ组心肌成纤维细胞中SOD活性明显降低,MDA含量显著增加,差异有统计学意义;与血管紧张素Ⅱ组相比,参草菌质200μg·mL-1、400μg·mL-1组心肌成纤维细胞中SOD活性明显升高,MDA含量显著降低,差异有统计学意义。6.与空白对照组比较,血管紧张素Ⅱ组心肌成纤维细胞TGF-β1/Smad2蛋白表达增强。与血管紧张素Ⅱ组比较,300μg·mL-1、400μg mL-1组心肌成纤维细胞TGF-β1/Smad2蛋白表达减弱。结论:新型中药原料药—参草菌质对异丙肾上腺素诱导的心肌纤维化具有抑制作用,并且能抑制由血管紧张素Ⅱ诱导的心肌成纤维细胞过度增殖,提示其有可能开发成防治心肌纤维化的创新药物。