【摘 要】
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目的:本研究旨在探究醛脱氢酶3家族成员A2（ALDH3A2）调节卵巢癌铁死亡,影响卵巢癌预后。方法:本文利用TCGA数据库、GTEx数据库、FerrDb数据库对卵巢癌样本进行生物信息学分析,筛选卵巢癌中铁死亡相关差异基因,并探究ALDH3A2表达量与卵巢癌预后的关系。通过siRNA及慢病毒调控卵巢癌细胞ALDH3A2的表达,并利用铁死亡诱导剂RSL-3处理卵巢癌细胞,通过qPCR、WB、CCK-8
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目的:本研究旨在探究醛脱氢酶3家族成员A2（ALDH3A2）调节卵巢癌铁死亡,影响卵巢癌预后。方法:本文利用TCGA数据库、GTEx数据库、FerrDb数据库对卵巢癌样本进行生物信息学分析,筛选卵巢癌中铁死亡相关差异基因,并探究ALDH3A2表达量与卵巢癌预后的关系。通过siRNA及慢病毒调控卵巢癌细胞ALDH3A2的表达,并利用铁死亡诱导剂RSL-3处理卵巢癌细胞,通过qPCR、WB、CCK-8、IF、流式、转录组测序等技术和方法,从卵巢癌细胞生物学功能、铁死亡标志物等层面研究ALDH3A2在卵巢癌中调控铁死亡的作用。对敲除ALDH3A2的卵巢癌细胞进行转录组测序,通过分析测序数据并设计实验探究ALDH3A2在卵巢癌中调控铁死亡的分子机制。最后利用慢病毒在卵巢癌细胞中过表达ALDH3A2并通过相关实验证实ALDH3A2对卵巢癌铁死亡的调控作用。结果:1、高表达ALDH3A2与卵巢癌患者预后不良密切相关,ALDH3A2高表达组总生存期（OS）、无进展生存期（FPS）、进展后生存期（PPS）均小于低表达组。2、与对照组相比,siRNA在卵巢癌细胞中抑制了ALDH3A2的表达,并导致卵巢癌细胞增殖减缓,同时增强了RSL-3诱导的卵巢癌铁死亡。3、构建的cas9慢病毒在卵巢癌细胞中敲除了ALDH3A2,导致卵巢癌细胞对RSL-3敏感性增强,表现为脂质过氧化物蓄积增多,细胞存活率下降。4、转录组测序显示ALDH3A2敲除影响了卵巢癌细胞谷胱甘肽（GSH）合成与代谢相关过程,检测细胞内GSH含量显示敲除ALDH3A2后卵巢癌细胞内GSH含量明显下降。5、构建的过表达慢病毒在卵巢癌中上调了ALDH3A2的表达,导致卵巢癌细胞对RSL-3敏感性降低,并明显升高细胞内GSH含量。结论:本研究表明,ALDH3A2高表达导致卵巢癌患者预后不良,ALDH3A2在卵巢癌细胞中抑制铁死亡的发生,为临床治疗卵巢癌提供一个潜在的治疗靶点。
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