辣椒抗疫病体细胞无性系变异筛选技术研究

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选用“2001”、“2056”和“2031”三个辣椒品种为试材,以子叶为外植体诱导愈伤组织,用辣椒疫病病原菌培养滤液制取粗毒素为筛选剂,研究了辣椒疫病病原菌粗毒素的产生条件及其生物活性,并在此基础上,用不同浓度粗毒素的筛选辣椒抗疫病愈伤组织,建立了辣椒抗疫病的筛选体系,获得了抗疫病的辣椒体细胞突变体植株。本研究获得的结果如下: 1.用胡萝卜汁培养液培养辣椒疫病病原菌,其培养滤液为辣椒疫病病原菌粗毒素,测定了粗毒素对辣椒叶片、辣椒种子发芽率、辣椒种子胚根生长、辣椒幼苗生长和辣椒愈伤组织的影响。结果表明,粗毒素能使辣椒叶片产生与疫病病原菌侵染类似的水渍状褐腐斑,抑制辣椒种子的发芽率,抑制辣椒幼苗和胚根的生长,抑制辣椒愈伤组织生长,并且粗毒素的这些抑制作用随着其浓度的升高而变强,不同品种所得出的实验结果一致。由此表明,可用辣椒疫病病原菌粗毒素来进行辣椒抗疫病体细胞突变体筛选的研究。2.对辣椒疫病病原菌粗毒素产毒条件的研究表明,胡萝卜汁培养液为辣椒疫病病原菌产毒的最适培养基,18d 为产毒最适培养时间,25-30℃为产毒最适培养温度,pH6-7为合适培养pH 值,在此条件下培养的辣椒疫病病原菌粗毒素毒性最强,可强烈抑制辣椒种子发芽。辣椒疫病病原菌粗毒素具有一定的热稳定性,经过高温高压处理后仍能强烈抑制辣椒种子的发芽。经高温高压处理过的粗毒素与未处理过的毒素相比有一定的毒性损失,可通过提高筛选时所用浓度达到与未处理过的粗毒素相同的效果。3.用“2001”、“2056”和“2031”的子叶作为外植体诱导产生愈伤组织,以辣椒疫病粗毒素为选择剂,筛选辣椒抗疫病细胞变异系。结果表明:辣椒疫病病原菌粗毒素对辣椒子叶愈伤组织的诱导、愈伤组织的生长及不定芽的分化具有显著的抑制作用,抑制作用随着粗毒素浓度的增加而增加,不同辣椒品种愈伤组织对毒素的忍耐力不同。4.实验获得了一批抗辣椒疫病再生植株,抗性细胞稳定性试验表明,细胞变异无性系对辣椒疫病具有稳定抗性。
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