肿瘤坏死因子α诱导蛋白8对胃癌的影响及其分子机制的研究

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研究目的:1.研究肿瘤坏死因子α诱导蛋白8(TNFAIP8)在胃癌中的表达情况及其对胃癌发生发展的影响2.体外研究TNFAIP8对胃癌细胞生长的影响3.探讨TNFAIP8对胃癌作用的相关分子机制。研究方法:1. TNFAIP8蛋白在胃癌及癌旁组织的表达情况及与临床病理相关性收集由山东大学第二医院、齐鲁医院与济南市第五人民医院所提供的86例胃癌及癌旁组织标本,这些标本均是临床诊断明确后经外科手术切除并通过病理确诊的,应用免疫组织化学染色SABC法检测86例胃癌及癌旁组织中TNFAIP8蛋白的表达情况并分析其与临床病理特征相关性。2. TNFAIP8对胃癌细胞生长的影响体外培养人胃癌细胞株SGC7901,脂质体介导重组质粒pcDNA3.0-TIPE转染SGC7901,通过细胞增殖实验(CCK8)检测TNFAIP8对胃癌细胞SGC7901生长的影响。3.体外TNFAIP8对胃癌细胞株SGC7901迁移与侵袭能力的影响SGC7901细胞经脂质体介导重组质粒pcDNA3.0-TIPE转染后,通过Trans well实验检测转染后SGC7901侵袭与迁移能力的差异。4. TNFAIP8影响胃癌的分子机制体外培养SGC7901细胞,经脂质体介导转染重组质粒pcDNA3.0-TIPE后,通过RT-PCR以及Western Blot检测其TIPE、E-cadherin、N-cadherin、Vimentin的表达。研究结果:1.免疫组化结果可见,癌旁组织中TNFAIP8的表达与胃癌组织存在明显差异(P<0.001), TNFAIP8蛋白的表达水平与性别、年龄、肿瘤大小无相关性;TNFAIP8蛋白的表达水平与肿瘤浸润深度、淋巴结转移情况相关,差异有统计学意义。2.转染pcDNA3.0-TIPE的SGC7901细胞较转染pcDNA3.0对照组细胞其细胞的数目明显增多(P<0.05)。3.转染pcDNA3.0-TIPE的SGC7901细胞较对照组细胞迁移与侵袭能力存在明显差异(P<0.001)。4. RT-PCR及Western Blot结果显示,SGC7901细胞过表达TIPE后较对照组其E-cadherin表达下降,N-cadherin、Vimentin表达升高。结论:1.TNFAIP8可促进胃癌的发生,并与胃癌的浸润与转移相关。2. TNFAIP8促进胃癌细胞SGC7901的增殖。3.TNFAIP8可增强SGC7901细胞的迁移与侵袭能力。4. TNFAIP8对胃癌的影响可能与EMT分子相关。意义:1.本文首次通过体内体外实验研究了TNFAIP8在胃癌发生发展中的作用2.首次对NFAIP8参与胃癌发生发展的分子机制进行了深入的探究,为胃癌的治疗提供了一个新的靶点。
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