多烯磷脂酰胆碱对耐奥沙利铂胃癌细胞耐药逆转作用的研究

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目的:探讨多烯磷脂酰胆碱对耐奥沙利铂胃癌细胞BGC823/L-OHP细胞是否有增殖抑制、逆转耐药作用及可能机制。  方法:采用CCK-8法检测多烯磷脂酰胆碱(0、0.5、1.5、3、6、12、24、48、64、86μmol/L)、奥沙利铂(1、5、10、20、30、40μg/mL)分别对耐奥沙利铂胃癌BGC823/L-OHP细胞株增值率的影响。同时检测多烯磷脂酰胆碱联合不同浓度奥沙利铂对胃癌细胞株BGC823、BGC823/L-OHP细胞生长作用的影响,计算奥沙利铂IC50。RT-PCR测定敏感株及耐药株中TLR4、Nanog、ABCF2mRNA表达量,通过Western blotting验证在蛋白水平的表达差异。  结果:多烯磷脂酰胆碱在0.5-48μmol/L浓度范围内有促进BGC823/L-OHP细胞增值的作用,在64μmol/L时抑制BGC823/L-OHP细胞生长。多烯磷脂酰胆碱在5μmol/L时逆转耐药作用最明显,奥沙利铂处理胃癌细胞48h后,细胞半数致死浓度(IC50)由28.53μg/mL下降到6.62μg/mL,逆转倍数为4.31。TLR4、Nanog、ABCF2基因在BGC823细胞中低表达,在BGC823/L-OHP细胞中出现高表达(P<0.05),加入多烯磷脂酰胆碱后其在耐药株中的mRNA表达量降低(P<0.05),且与BGC/823细胞相比无明显差异。Western blotting检测结果显示,多烯磷脂酰能够下调TLR4、Nanog、ABCF2蛋白表达,结果具有统计学意义(P<0.05)。  结论:多烯磷脂酰胆碱与奥沙利铂联合应用后,能够增加耐药株对奥沙利铂的敏感性,抑制BGC823/L-OHP细胞生长,从而逆转耐药。其机制可能与下调TLR4、Nanog、ABCF2蛋白的表达从而逆转胃癌细胞耐药性。
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