半滑舌鳎养殖群体遗传结构分析及性别特异AFLP分子标记的筛选

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半滑舌鳎是一种珍贵的海水鱼类,生长速度快,个体大,营养丰富,具有很高的经济价值。近年来,由于过度捕捞、环境污染等原因,自然资源逐年减少,已经引起人们的关注,并逐渐成为养殖业的新宠。本研究,将养殖群体作为研究对象,利用当前最为有效的分子标记手段AFLP,分析其遗传多样性,从而辅助半滑舌鳎的育种工作。同时,由于半滑舌鳎雌雄个体生长速度差异比较大,雌鱼的生长速度是雄鱼的2-3倍;而且,成鱼雌雄个体的差异明显,雌鱼最大体长可达820mm,雄鱼的最大体长为420mm左右,最小体长只有198mm。如果能够实现单雌化养殖,将会节省成本,提高经济效益。本实验利用AFLP技术,寻找半滑舌鳎性别特异的分子标记,为半滑舌鳎育种提供辅助手段。本文的主要工作和结论如下所述:1.利用14个AFLP引物组合,对半滑舌鳎养殖群体30个个体进行了遗传结构分析。共产生了1145条清晰的条带,多态率介于40 %~77 %之间,平均为62.20 %,群体内个体间遗传多样性为0.1968,与文献报道的亲缘关系相近鱼种相比遗传多样性较高,说明所研究的半滑舌鳎养殖群体具有较高的选育潜力。2.利用64个AFLP引物组合,扫描半滑舌鳎雌雄群体的基因组DNA,其中4个引物组合扩增出了7个雌性性别特异的DNA条带。将标记M1的条带挖下,再扩增、回收、克隆、测序,获得其核苷酸序列。根据标记M1的核苷酸序列设计一对引物,可以从雌性个体基因组DNA里扩增到特异条带,在雄性个体里不出现这个条带,这样,就成功的把AFLP标记M1转化为SCAR。这个SCAR标记直接用于检测半滑舌鳎的性别,可以节省大量的人力、物力和时间。
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