香栓菌的生物学特性及其药理活性研究

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香栓菌是一种一年生大型药用真菌,分布在我国黑龙江、吉林、辽宁、陕西、安徽、云南等大部分地区,主要生长在杨柳树上。本论文对香栓菌与古代白芝进行了本草考证,同时因对香栓菌有关归肺经方面功效研究至今无人问津,本文还对香栓菌中的活性成分及其有关归肺经方面的药理活性进行了研究。综述部分介绍了香栓菌的目前研究现状并对常见的有关止咳化痰和耐缺氧方面的药理实验方法进行了归纳与分析概述。研究内容分为五个部分,即香栓菌的本草考证,香栓菌生物学特性研究,香栓菌的GC-MS分析,香栓菌的抗氧化及止咳化痰药理活性研究,香栓菌的耐缺氧药理活性研究。在第一章白芝的本草考证方面,对古代“白芝”的名称、分布、形态学和功效等方面做了一系列考证。根据历代本草文献中记载“白芝”的特点,将其与现代多孔菌科真菌香栓菌的名称、分布、形态学和功效的方面进行考证,同时对被认为可能是白芝的苦白蹄、以及被人熟知的桦剥管菌、白肉灵芝三种真菌进行了考证并找到其与白芝记载不相符的地方,结果表明古代文献中记载的白芝为现代真菌香栓菌。在第二章香栓菌的生物学特性方面,研究了不同温度、初始pH、碳源和氮源在固体培养条件下对香栓菌菌丝生长状况的影响,对以上4个因素进行单因素试验,从中选出3个最优水平进行正交试验。结果表明,香栓菌的最适生长温度为28℃;最适初始pH为5;最适碳源为葡萄糖;最适氮源为牛肉膏。在第三章香栓菌提取物的GC-MS分析方面,对香栓菌子实体,液体发酵培养基,液体发酵菌液、石油醚提取物、水提取物、挥发油成分,分别作了GC-MS成分分析。结果表明,香栓菌子实体中含有多种物质,其中对甲氧基苯甲酸甲酯含量最高,其次是茴香酸乙酯,同时在各提取中主要成分为脂类,其中邻苯二甲酸二丁酯含量最多。在第四章香栓菌的抗氧化及止咳化痰药理活性方面,以香栓菌子实体为材料,采用回流提取法分别得到石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯及甲醇提取物并采用水煎法提取到其水提物,以DPPH与ABTS自由基清除率为指标评价各提取物抗氧化活性。同时针对香栓菌石油醚和水提取物,采用浓氨水引咳法和酚红排泌法对小鼠的止咳化痰活性进行研究,分别将雄性小鼠随机分成8组和9组(每组10只),即阴性对照组,阳性对照组,香栓菌石油醚提取物低、中、高剂量组,香栓菌水提物低、中、高剂量组。检测了小鼠咳嗽抑制率(%),止咳活性(%),酚红排泌量,化痰率(%)。抗氧化试验结果表明,提取物有清除DPPH和ABTS自由基能力,并在一定范围内呈现量效关系。其中甲醇提取物对DPPH和ABTS自由基清除能力最强。止咳化痰试验结果表明,除香栓菌石油醚提物低剂量组外均可延长咳嗽的潜伏期并降低2min内的咳嗽次数;同时石油醚提取物中剂量组与水提物中剂量组均可显著提高其酚红含量及校正酚红含量,提高小鼠的化痰率。在第五章耐缺氧药理活性研究方面,针对香栓菌不同极性提取物,采用常压耐缺氧法、对抗亚硝酸钠中毒性缺氧法,心肌缺血性缺氧法。将雄性小鼠随机分成7组(每组10只),分别为阴性对照组、香栓菌石油醚提取物低、中、高剂量组,香栓菌水提物低、中、高剂量组。小鼠的检测指标包括常压条件下耐缺氧存活时间,亚硝酸钠中毒存活时间,急性脑缺血性存活时间及血清中SOD、MDA、IL-2、IL-4、IgG含量。结果表明,香栓菌石油醚高剂量组和水提物中、高剂量组均可延长急性脑缺血性缺氧存活时间,提高SOD、IL-2、IL-4、IgG含量,降低MDA含量,同时水提物低、中、高剂量组可延长常压耐缺氧存活时间,并且水提物高剂量组还可以延长中毒性脑缺血存活时间。
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