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目的:本研究首先探讨了M2型肿瘤相关巨噬细胞(M2型TAMs)浸润与食管癌患者预后的相关性,并分析食管癌组织中M2型TAMs浸润的临床病理学意义。其次,通过构建M2型TAMs与食管癌细胞的体外共培养体系,探讨共培养对食管癌上皮间质转化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)及细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响。最后,收集共培养上清,运用抗体芯片筛选共培养后差异表达的蛋白因子,研究M2型TAMs分泌的蛋白因子对食管癌细胞EMT及迁移、侵袭能力的影响,初步探讨M2型TAMs参与调控食管癌细胞恶性表型的相关分子机制。方法:1)Meta分析食管癌组织中M2型TAMs浸润的临床病理学意义;通过免疫组化(Immuno histo chemical,IHC)染色检测食管癌组织中M2型TAMs的浸润,分析M2型TAMs浸润与患者预后的相关性及M2型TAMs浸润的临床病理学意义;2)构建M2型TAMs与食管癌细胞共培养体系,观察共培养后食管癌细胞的形态学改变,运用q RT-PCR和Western-blot检测共培养后食管癌细胞EMT相关标志物的表达,通过细胞增殖试验(MTT Assay)、细胞迁移试验(Wound-healing Assay)、细胞侵袭试验(Transwell Assay)检测共培养对食管癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响;3)抗体芯片筛选共培养后差异表达的蛋白因子,观察M2型TAMs所分泌的蛋白因子诱导对食管癌细胞形态学改变的影响,运用qRT-PCR和Western-blot检测蛋白因子诱导后食管癌细胞EMT相关标志物的表达,通过MTT试验、Wound-healing试验、Transwell试验分别检测蛋白因子诱导对食管癌细胞增殖、迁移、侵袭能力的影响,初步探讨M2型TAMs参与调控食管癌细胞恶性表型的相关分子机制。结果:1)Meta分析结果表明,M2型TAMs浸润与食管癌患者淋巴结转移、临床分期及T分期具有统计学相关性。免疫染色结果表明,食管癌及癌旁对照组织中均可见M2型TAMs浸润,M2型TAMs在食管癌中浸润密度明显高于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。临床病理学分析表明,M2型TAMs浸润与食管癌患者淋巴结转移(P=0.018)和T分期(P=0.021)具有统计学相关性(P<0.05),与患者年龄(P=0.862)、性别(P=0.249)、临床分期(P=0.563)、肿瘤直径(P=0.898)无统计学相关性(P>0.05);Kaplan-Meier(K-M)生存曲线分析表明,M2型TAMs浸润与食管癌患者预后呈现出负相关的趋势(P=0.000);2)食管癌细胞与M2型TAMs共培养后发生形态学改变,qRT-PCR和Western-blot结果表明,共培养后食管癌细胞上皮标志物表达减少,而间质标志物表达增加。细胞功能学试验结果表明,共培养后食管癌细胞迁移、侵袭能力增强,而细胞增殖能力无明显改变;3)抗体芯片结果表明,M2型TAMs与食管癌细胞共培养后,IL-1β(上调829.43倍)和MCP2(上调808.41倍)表达明显增加,与非共培养组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。IL-1β和MCP2诱导后,食管癌细胞发生EMT,细胞迁移、侵袭能力明显增强,但IL-1β诱导后食管癌细胞增殖能力无明显改变。此外,Western-blot结果表明,IL-1β和MCP2诱导可激活NF-κB信号通路,使用NF-κB通路抑制剂(BAY11-7082)则可减弱NF-κB信号通路的磷酸化水平。结论:1)M2型TAMs在食管癌组织中的浸润密度明显高于癌旁对照组织,M2型TAMs浸润与患者预后及淋巴结转移、T分期具有统计学相关性;2)M2型TAMs与食管癌细胞共培养,可引起食管癌细胞发生EMT,增强食管癌细胞的迁移和侵袭能力;3)M2型TAMs分泌的IL-1β和MCP2,可引起食管癌细胞发生EMT,增强食管癌细胞的迁移和侵袭能力。M2型TAMs分泌的IL-1β和MCP2有可能通过激活NF-κB信号通路参与调控食管癌细胞的恶性表型。