目的:通过构建HBX的真核表达载体pcDNA3.1-X，并将其转染人正常肝细胞HL-7702和肝肿瘤细胞HepG2，构建表达HBX的HL-7702/HBX和HepG2/HBX细胞模型，为进一步探讨HBX在HBV感染和HCC发生、发展中的作用搭建新的研究平台，为HBV感染的治疗和相关肝癌疫苗的设计提供相应的实验基础。 方法:通过设计HBX的特异性引物，应用RT-PCR的方法从HepG 2.2.15细胞中获取HBXcDNA，将其导入真核表达载体pcDNA3.1中，通过PCR、双酶切鉴定后，选出阳性克隆进行DNA测序鉴定。将构建成功的HBX真核表达载体pcDNA3.1-X用脂质体转染法分别转染HL-7702细胞和HepG2细胞，G418筛选阳性克隆。以转染空质粒pcDNA3.1和未转染的细胞作为对照。通过RT-PCR检测HBXmRNA表达情况；通过Western blot和免疫荧光检测HBx蛋白表达情况。 结果:重组质粒通过PCR、双酶切后电泳显示存在与目的基因大小相同的条带，DNA测序结果显示与Genebank公布的HBX基因序列一致。重组质粒转染细胞后，RT-PCR鉴定显示，只有转染pcDNA3.1-X的HL-7702细胞和HepG2细胞有HBXmRNA表达；Western blot和免疫荧光检测显示，仅转染pcDNA3.1-x的HL-7702细胞和HepG2细胞有HBx蛋白表达。 结论： 1．HBX真核表达载体pcDNA3.1-X构建成功。 2．成功建立HBX基因真核细胞模型HL-7702/HBX和HepG2/HBX。