本文以霍山石斛多糖(DHP)为材料,以巨噬细胞为对象,旨在对霍山石斛多糖的免疫细胞受体及其介导的下游信号通路进行研究,以期阐明霍山石斛多糖激活巨噬细胞的信号转导机制。　　取得的研究结果如下:　　(1)浓度梯度实验表明,DHP能够促进巨噬细胞分泌NO、TNF-α和IL-1β,且具有一定的剂量依赖性,当浓度达到100μg/mL时,三种因子的分泌较对照组显著提高。　　(2)基于多糖荧光标记技术,激光共聚焦显微镜和流式细胞仪分析发现,DHP可以与巨噬细胞专一性地结合,且这种结合具有饱和性、能被抗TLR4抗体抑制。药效学实验显示,抗TLR4抗体几乎完全阻断了DHP诱导巨噬细胞产生NO、TNF-α和IL-1β,且DHP对野生型小鼠C3H/HeN腹腔巨噬细胞产生NO、TNF-α和IL-1β的作用显著强于TLR4基因缺陷型小鼠C3H/HeJ腹腔巨噬细胞对DHP的响应。这些结果表明,DHP主要通过TLR4激活巨噬细胞。　　(3)Western Blot分析表明,DHP可诱导TLR4下游p38、ERK、JNK、Akt的磷酸化和NF-κB p65的核移位,而NF-κB、p38、ERK、JNK、PI3K特异性抑制剂显著抑制了DHP对巨噬细胞产生NO、TNF-α和IL-1β的诱导作用,说明DHP可通过TLR4介导的NF-κB、MAPKs和PI3K/Akt信号通路激活巨噬细胞。