【摘 要】
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该文应用酿酒酵母2u环的FLP-FRT位点特异性DNA重组系统在酿酒酵母中建立了由FLP重组酶所介导的位点特异性DNA切离和染色体定点整合技术,并应用这项技术测定了酵母蔗糖基因(SU
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该文应用酿酒酵母2u环的FLP-FRT位点特异性DNA重组系统在酿酒酵母中建立了由FLP重组酶所介导的位点特异性DNA切离和染色体定点整合技术,并应用这项技术测定了酵母蔗糖基因(SUC2)在染色体不同位置进行顺向和反向整合时的表达水平,对酵母染色体位置效应进行了研究.研究小组发现SUC2基因在酵母染色体上整合表达时存在染色体位置效应,表现为基因表达水平存在差异.但就总体而言,染色体位置对SUC2基因表达水平的影响并不太显著.在此项工作的基础上,选择了若干个有代表性的染色体位点对乙肝病毒融合表面抗原SA-28基因进行了整合表达,研究了基因剂量和染色体整合位置对SA-28基因表达水平的影响,取得了不同基因在同一染色体位点进行整合表达的一些规律.研究小组还选取了两个感兴趣的染色体位点,对其部分DNA序列进行了测定,确定了其在酵母染色体上的位置,分析了它对整合在其旁侧外源基因的表达可能造成的影响.研究小组还应用FLP重组酶介导的位点特异性DNA切离技术对一株脆壁克鲁维酵母菌株进行了LEU2基因中断的工作还没有取得成功.
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