【摘 要】
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蛋黄油是雉科动物卵黄中脂溶性提取物的总称,既可以食用,又具一定的药用价值,有促进皮肤表面创口愈合与抑制炎症等作用。近年蛋黄油又被用于治愈啮齿动物的胃溃疡,而对其药理活性相关研究较少,由于蛋黄油活性物质复杂,蛋黄脂质组分的分离对明确探究其药理作用机制具重大意义。为探求蛋黄油中对小鼠消化性胃溃疡有治愈作用的脂质组分,并将其制为稳定的粉末油脂。本文首先建立了一种从蛋黄粉中提取蛋黄油并将其分离为四种不同性
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蛋黄油是雉科动物卵黄中脂溶性提取物的总称,既可以食用,又具一定的药用价值,有促进皮肤表面创口愈合与抑制炎症等作用。近年蛋黄油又被用于治愈啮齿动物的胃溃疡,而对其药理活性相关研究较少,由于蛋黄油活性物质复杂,蛋黄脂质组分的分离对明确探究其药理作用机制具重大意义。为探求蛋黄油中对小鼠消化性胃溃疡有治愈作用的脂质组分,并将其制为稳定的粉末油脂。本文首先建立了一种从蛋黄粉中提取蛋黄油并将其分离为四种不同性质组分的方法,并对部分组分进行碘值和皂化值的标定与脂肪酸组成测定;其次将四种组分应用胃溃疡模型小鼠进行动物实验,筛选出蛋黄油中对促进消化性胃溃疡愈合的有效脂质组分;最后以麦芽糊精、β-环糊精与大豆分离蛋白作为壁材,蔗糖脂肪酸酯与单硬脂酸甘油酯作为乳化剂利用喷雾干燥技术将蛋黄油包埋成微胶囊产品,弥补蛋黄油粉末油脂的空白,即进一步推进蛋黄油产品化。1.从蛋黄粉中提取分离蛋黄油的方法。为了建立从蛋黄粉中提取分离蛋黄油的方法,利用溶剂萃取法对蛋黄粉中的脂质进行提取,并根据不同有机溶剂提取蛋黄油和磷脂的产率,蛋黄油的碘值和皂化值筛选蛋黄粉原料、蛋黄油提取溶剂、磷脂提取溶剂以及蛋黄油分离溶剂。此外对除了磷脂以外的三种蛋黄油组分进行脂肪酸组成分析,研究其差异性。实验选用亳州海川蛋业所提供的蛋黄粉,以乙醇作为一次提取提取剂从蛋黄粉中得到醇提蛋黄油与醇提蛋黄粉残渣,醇提蛋黄粉残渣用石油醚进行二次提取得到石油醚蛋黄油,醇提蛋黄油再以1:12(w/v)丙酮分离磷脂并得到去磷脂醇提蛋黄油,去磷脂醇提蛋黄油以等比例乙腈乙醇溶液提取分层得到上层蛋黄油与下层蛋黄油。蛋黄粉中的脂质被分为四个组分,在蛋黄总脂质中上层蛋黄油占18.43%,下层蛋黄油占40.62%,石油醚蛋黄油占9.78%,磷脂占31.16%。四脂质组分碘值分别为上层蛋黄油(99.5±0.5)>下层蛋黄油(84.0±1.0)>磷脂(77.0±0.5)>石油醚蛋黄油(76.8±0.6),皂化值分别为石油醚蛋黄油(193.47±0.42)>下层蛋黄油(181.65±0.12)>磷脂(177.54±1.28)>上层蛋黄油(161.92±0.10)。对除磷脂外的三种液态脂质进行的脂肪酸组成测定又表示出上层蛋黄油不饱和度最高,多不饱和脂肪酸占比最高(20.6%),还含有较多ω-3 PUFAs(Omega-3多不饱和脂肪酸)等许多保健功效的脂肪酸。2.蛋黄油不同组分促进小鼠消化性胃溃疡愈合性能评价。比较蛋黄油中分离的四种脂质对促进小鼠消化性胃溃愈合的影响,从而筛选有效组分。用从蛋黄粉中提取分离的四种脂质分别对6周龄胃溃疡模型小鼠灌胃5 d,通过对胃窦进行感官观察,对胃体进行组织病理学分析,并测定胃组织超氧化歧化酶活性(Superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)浓度、谷胱甘肽过氧化酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)浓度、内皮素1(Endothelin-1,ET-1)浓度和一氧化氮(Nitric oxide,NO)浓度评价不同脂质组分对小鼠消化性胃溃疡的愈合作用。结果表明:给药上层蛋黄油和磷脂后,小鼠胃窦感官上愈合较好,胃体病理组织学分析呈现良好的细胞完整性且抑制炎性细胞浸润,生化指标也被调整至正常值。此外进行验证性实验,将两有效脂质组分浓度降至一半后应用该模型,结果显示低浓度上层蛋黄油仍对小鼠消化性胃溃疡有显著愈合作用,但低浓度磷脂效果较差。结合其性质,推测上层蛋黄油由于含有更多不饱和脂肪酸与营养保健功能脂肪酸,对促进消化性胃溃疡愈合效果更好。因此有着高多不饱和脂肪酸占比的上层蛋黄油和磷脂为蛋黄脂质中促进消化性胃溃疡愈合的有效组分。3.蛋黄油微胶囊制备。为了提高蛋黄油的贮藏性能,让其具备更稳定的形态以及更广泛的应用领域,采用微胶囊包埋技术将蛋黄油制成粉末油脂。选用麦芽糊精、β-环糊精与大豆分离蛋白作为壁材,蔗糖脂肪酸酯与单硬脂酸甘油酯作为乳化剂用喷雾干燥进行微胶囊制备,使用扫描电镜和马尔文激光粒度仪进行超微结构观察,以包埋率30d变化趋势判定其稳定性。结果显示,微胶囊壁芯比为4:1,壁材采用麦芽糊精与β-环糊精比例4:1且大豆分离蛋白添加量5%,乳化剂添加量为总干料的3%,干料总为比25%,以此制备出上层蛋黄油的粉末油脂。产品呈现细腻的淡黄色粉末状态,无异味,微观下观察包埋也较成功,体积平均粒径为28.71μm,包埋率达81%,且在30d内无显著变化。
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