P物质在变应性气道炎症中生物节律性表达的实验研究

来源 :南京医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:wuyonghong1974
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目的:建立变应性气道炎症小鼠模型,观察其病理学改变,检测上下气道P物质(Substance P,SP)在不同时间段内的表达差异,探讨P物质在变应性气道炎症小鼠中的生物节律性表达。方法:将84只68周龄雄性BABL/c小鼠随机分为14个组,分别为实验组(0:00组,04:00组,08:00组,12:00组,16:00组,20:00组,24:00组)和对照组(0:00组,04:00组,08:00组,12:00组,16:00组,20:00组,24:00组),每组6只,实验组以卵清蛋白(Ovalbumin,OVA)+Al(OH)3+PBS水行腹腔右侧注射基础致敏,以5%OVA超声雾化吸入及2.5%OVA滴鼻激发,对照组以等量的生理盐水代替OVA基础致敏、雾化吸入及滴鼻激发。造模完成后,记录其症状并用叠加法计分,大于5分为造模成功。对实验组及对照组小鼠进行右侧心室采血,离心后取上清液,行酶联免疫吸附试验(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)测定上清液中SP蛋白的表达量。采用RT-PCR技术检测不同时间段内SP在鼻腔组织、肺组织及支气管组织中基因表达的分布及含量。取小鼠鼻腔组织、左肺组织及左主支气管组织行免疫组化染色,观察组织切片中SP阳性细胞的表达及分布。结果:实验组各时间段内血浆中SP含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),其中,实验组0:00组(321.99±26.41)pg/ml、04:00组(310.76±23.1)pg/ml及24:00组(335.62±25.82)pg/ml SP含量明显高于实验组其他时间段,差异有统计学意义(P<0.05)。小鼠鼻腔组织、左肺组织左主支气管组织中SPmRNA表达明显高于各自对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组小鼠鼻腔组织、左肺及左主支气管免疫组化切片中SP表达显著高于对照组。结论:P物质参与了变应性气道炎症的发病过程,且在其中呈现生物节律性表达,在0:00-04:00间出现表达峰值,提示神经肽在变应性气道炎症的发生、发展中起重要作用,在上气道和下气道中均有生物性表达,为进一步深入了解变应性气道炎症的生物节律性提供依据,并初步揭示了神经肽在其生物节律性中的作用及意义,同时可能为变应性气道炎症的针对性给药时间提供新的理论参考。
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