论文部分内容阅读
目的：本实验旨在通过对血清RTN3的血清学分析,初步探讨RTN3在血清中稳定存在的原因,并分析动脉粥样硬化病人与正常人间是否存在差异；通过对K562细胞分化过程中RTN3表达变化的研究,初步探讨血清RTN3的来源及其在细胞分化过程中可能存在的作用。方法：(1)收集正常人和病人的外周血液及他们的相关信息,WB检测血清RTN3,并用胰酶处理血清检测RTN3的降解情况；(2)ELISA检测正常人和病人血清RTN3含量的差异,并结合其他血清学指标进行相关统计学分析；(3)分离外周血单个核细胞对RTN3进行表面免疫荧光染色,用流式细胞术检测细胞表面荧光；(4)利用公共数据库的蛋白质芯片数据分析RTN3在血液系统中的表达情况；检测K562细胞及上清中的RTN3,利用丁酸钠诱导K562分化,检测RTN3表达及其在细胞内分布情况。结果：(1)正常人与动脉粥样硬化病人血清中均能检测出RTN3；WB检测到胰酶处理的血清中存在RTN3的降解带,且降解带与胰酶处理时间并无直接联系；(2)血清ELISA结果分析表明,病人血清中RTN3的含量比正常人高,且病人血清RTN3含量与其血清HDL水平呈负相关；在细胞实验中发现在一定浓度范围内,巨噬细胞RAW264.7内RTN3的表达随着HDL作用浓度的升高而降低；(3)分离外周血单个核细胞进行流式细胞术检测显示,单个核细胞表面存在RTN3的表达；(4)在K562上清中也检测出RTN3的存在；丁酸钠诱导K562分化过程中,RTN3的表达及其在细胞中分布均发生变化；公共数据库的蛋白质芯片数据分析发现RTN3在血液系统中有较高的表达。结论：(1)血清RTN3胰酶处理后,并未完全降解,初步说明了RTN3能较稳定存在于复杂血液系统中的原因；(2)正常人和动脉粥样硬化病人血清RTN3存在差异,病人血清RTN3与其HDL水平呈负相关,可以作为动脉粥样硬化的标志物；(3)外周血单个核细胞表面检测到RTN3的表达以及在K562细胞上清中检测出RTN3,说明血清RTN3可能来源于血液细胞中；(4)RTN3在K562分化中表达及分布发生变化,说明其可能参与内质网结构的变化从而影响细胞分化。图12幅,表2个,参考文献91篇