砧木南瓜种质遗传多样性分析及抗病性鉴定

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近年来,随着我国设施西葫芦栽培面积的不断扩大及重茬种植,土传病害发生率逐年上升,主要由茄病镰刀菌等引起的根腐病给西葫芦生产带来了重大的经济损失。目前,在西葫芦生产上还未发现由茄病镰刀菌引起的抗西葫芦根腐病的材料及品种。因此,扩大范围,在其他瓜类中筛选抗茄病镰刀菌的种质资源和砧木,为西葫芦生产提供优良抗病砧木,抗性种质转育西葫芦并选育出抗病西葫芦新品种,是提高西葫芦根腐病的综合防治的有效措施之一,对推动西葫芦产业健康发展具有极强的理论和实践意义。本研究以72份砧木种质(71份砧木南瓜自交系,1份砧木葫芦自交系)为供试材料,通过苗期人工适宜孢子浓度伤根法进行根腐病抗性评价,筛选抗感供试材料,并探讨不同抗性砧木南瓜与相关生理生化物质的关系,来解释其抗病机理;结合SSR分子标记技术遗传多样性分析,从分子水平上明确不同供试材料间遗传相似系数等的差异,为抗茄病镰刀菌砧木南瓜等的新品种选育、抗性种质转育西葫芦提供了科学依据。主要研究结果如下:1.采用苗期人工适宜孢子浓度伤根法接种茄病镰刀菌,12 d后观察并计算病情指数,进行抗性分级和供试材料筛选。结果显示,供试材料均不同程度发病,病情指数变化范围在21.66~100.00。基于根腐病抗性评价标准,可将72份材料划分到抗、中抗、感、高感4个不同抗性等级。其中抗病材料共5份,约占总供试材料6.9%;中抗材料共19份,约占总供试材料26.4%;感病材料共21份,约占总供试材料29.2%;高感材料共27份,约占总供试材料37.5%;无高抗材料。2.以抗病47和高感9为供试材料接种茄病镰刀菌,分别于0、2、4、6 d取其叶片进行过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活性及丙二醛(MDA)、可溶性糖含量测定。结果表明,抗病47的POD活性增加量明显高于高感9;SOD活性随时间的变化呈现先降低后上升趋势,其中,抗病47和高感9在第2、4 d出现了急剧上升现象,且抗病47的SOD活性较于高感9高;抗病47、高感9的CAT活性呈先下降后上升趋势,高感9的CAT活性明显高于抗病47;高感9的MDA含量明显高于抗性47;抗病47的可溶性糖含量较于高感9高;初步表明POD、SOD、CAT活性及MDA、可溶性糖含量变化可作为砧木南瓜对根腐病抗性评价的生理生化指标。3.利用12对SSR引物对72份供试材料进行SSR分析,共扩增出79个条带,多态性条带(NPB)79条,多态性比率(PPB)为100%。23份抗及中抗供试材料(不含72,砧木葫芦)遗传多样性分析中,12对SSR引物共检测出60个基因位点,等位基因数(Na)的平均值为5,有效等位基因(Ne)平均值为2.478;平均Shannon信息指数(I)为1.037;多态信息含量(PIC)在0.190~0.775之间,平均值为0.477,其结果较好的揭示了抗及中抗供试材料的遗传多样性。72份供试材料的遗传相似系数范围在0.594~1.000之间,平均值为0.838。UPGMA聚类结果显示,供试材料在遗传距离为0.79处可划分为四大类群,类群Ⅰ共65份,砧木来源于南瓜及趋于南瓜类型;类群Ⅱ共5份,砧木来源于笋瓜;类群III共1份,砧木来源于黑籽南瓜。类群Ⅳ共1份,砧木来源于葫芦。
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