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目的:食管癌是发生于食管上皮组织的肿瘤,是世界第九大肿瘤,全球每年约有30万人死于食管癌。根据世界癌症报告数据统计显示食管癌的癌症死亡数排在所有肿瘤的第7位。我们国家作为食管癌的高发区域,其发病率和死亡率在众肿瘤里仍然遥遥领先。食管癌在男性中的发病率和死亡率要远远高于女性。尽管综合治疗的研究使食管癌的疗效有了进一步提高,但是其5年的生存率相比其他肿瘤依然不尽人意。食管癌主要有两种亚型:鳞癌和腺癌。腺癌多位于远端食管,而鳞癌则可贯穿整个食管。在我们国家的食管癌发病中90%以上的组织学类型都是鳞状细胞癌,少数则为起源于食管腺体或异位胃粘膜的腺癌。食管癌的发生因地域差异而有所不同,目前除了烟草,酒精摄取等公认为食管鳞癌的高危因素外,越来越多的研究报道,基因突变,表观遗传等外环境因素同样可以诱发食管癌。来自日本一项研究对144例食管鳞癌患者进行全基因组测序发现许多驱动基因发生基因改变,并且这些改变影响着食管鳞癌患者的预后,由此说明基因突变和分子遗传学改变与食管鳞癌的发生发展密切相关。锌指蛋白是哺乳动物最常见的一类转录因子,其中超过1/3的锌指蛋白都包含有KRAB-ZNF这样一个结构域。这个结构域具有强大的转录抑制作用,可通过与靶分子DNA序列特异性结合,在转录和翻译水平上调控基因的表达。ZNF382就是位于19q13.12的新的抑癌基因。我们前期研究发现ZNF382在正常组织中广泛表达,但在癌细胞系及原发癌(鼻咽癌、食管癌、结肠癌、乳腺癌)组织中表达普遍衰减,MSP实验进一步发现ZNF382在癌细胞系和原发癌组织表达水平的显著下调是由于启动子CpG岛发生高频甲基化。因此本课题主要探讨研究ZNF382在人食管鳞癌中的表观遗传学调控及抑制人食管鳞癌细胞生长与转移的功能与分子机制研究。方法和结果:实时荧光定量PCR检测15对人食管鳞癌组织和癌旁组织中ZNF382的差异性表达,结果显示ZNF382在人食管鳞癌组织中的表达水平显著低于癌旁组织(p<0.05)。MSP分别检测ZNF382在114例人食管鳞癌组织与3例正常食管上皮组织中的甲基化状态,发现87%的食管鳞癌组织发生了启动子区的甲基化,而在正常食管上皮组织中甲基化发生率只有33%。同时TCGA在线数据库分析183例食管鳞癌患者ZNF382表达水平差异与食管鳞癌患者5年总生存的相关性,发现ZNF382表达水平较高的患者,其5年总生存期较长。进而我们通过一系列生物学功能实验分别在食管鳞癌细胞中外源性过表达ZNF382及敲低内源性ZNF382表达后,观察其对食管鳞癌细胞增殖,凋亡以及转移的作用。最后为进一步明确ZNF382在食管鳞癌中发挥细胞功能的具体分子机制,我们送检了RNA-sequence测序并结合GEO数据库的CHIP-Seq测序结果,联合生物信息学分析,RT-PCR验证,Western blot及双荧光素酶报告实验得出结论,ZNF382作为19q13.12的新抑癌基因通过直接结合到DVL2和FZD1基因的启动子区抑制Wnt/β-catenin信号通路活性从而在人食管鳞癌细胞中发挥抑癌功能。结论:ZNF382是位于19q13.12的新抑癌基因,直接结合到FZD1和DVL2基因的启动子区抑制Wnt/β-catenin通路活性从而在人食管鳞癌细胞中发挥抑癌作用。