左旋多巴生产废液的化学成分及活性研究

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目的:研究左旋多巴生产废液的化学成分,为改进生产工艺和提高产品质量打下基础;研究废液的石油醚部位、乙酸乙酯部位及正丁醇部位体外对NG108-15细胞增殖的作用,为废液的细胞活性研究提供科学依据;研究猫豆石油醚部位、乙酸乙酯部位的化学成分及石油醚部位的抗氧化活性,进一步补充猫豆的非左旋多巴成分研究数据。方法:收集左旋多巴生产过程中精制工艺的废液,浓缩烘干,打碎作为浓缩物样品;猫豆破壁打碎作为猫豆样品。两部分样品均采用95%乙醇回流法提取,分别得到乙醇总提取浸膏,再分别用系统溶剂分离法萃取得到石油醚部位、乙酸乙酯部位以及正丁醇部位。继续采用薄层色谱法、硅胶柱色谱法、重结晶法、凝胶柱色谱法、大孔吸附树脂法、制备型高效液相色谱法等分离技术和方法对其化学成分进行分离纯化,获得单体化合物后再利用IR、1H-NMR、13C-NMR、MS等方法,结合理化性质进行结构鉴定。采用MTT法研究废液的石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位体外对NG108-15细胞增殖的影响。利用GC-MS联用技术对猫豆的石油醚部位进行检测分析,并采用清除DPPH和ABTS+自由基能力的实验检验其抗氧化活性能力。结果:从废液中分离得到12个单体化合物,鉴定了其中8个,分别为:Soyasapogrnol B、硬脂酸(Octadecanoic acid)、亚油酸(Linoleic acid)、5α,8α-环二氧-(22E,24R)-麦角甾-6,22-二烯-3β-醇、原儿茶(protocatechuic acid),6,7-Dihydroxy-1-methyl-1,2,3,4-tetrahydro-isoquinoline-3-carboylic acid,6,7-Dihydroxy-1-Benzyl-1,2,3,4-tetrahydro-isoquinoline-3-carboylic acid、苯丙氨酸(Phenylalanine);从猫豆中分离得到7个单体化合物,鉴定了其中5个,分别为:β-胡萝卜苷(β-daucosterol)、豆甾醇(Stigmasterol)、棕榈酸(palmitic acid)、正三十烷醇(1-triacontanol)、十八酸-2,3-二羟基丙酯(Octadecanoic acid,2,3-dihydroxypropyl ester);猫豆的石油醚部位GC-MS共检出19个成分,并全部鉴定;废液的石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位体外对NG108-15细胞增殖均具有明显的抑制作用,石油醚部位的IC50为37.14μg?mL-1,乙酸乙酯部位的IC50为44.89μg?mL-1,正丁醇部位的IC50为49.03μg?mL-1,左旋多巴对照品的IC50为44.56μg?mL-1,猫豆的石油醚部位具有一定的抗氧化活性能力,半数清除率浓度IC50值分别为46.62 mg?mL-1,41.51 mg?mL-1。结论:从生产废液中分离鉴定的8个化合物和从猫豆中分离鉴定的5个化合物均为首次分离获得;首次利用GC-MS联用技术分析检测出猫豆石油醚部位含有19个组分,并全部鉴定,以脂肪酸为主;与空白组比较,废液的石油醚部位、乙酸乙酯部位和正丁醇部位体外对NG108-15细胞增殖均具有明显的抑制作用(P<0.05或P<0.01),具有统计学意义;与对照组比较,IC50值大小依次排列为正丁醇部位>乙酸乙酯部位>左旋多巴对照品>石油醚部位,即石油醚部位的抑制作用效果最强;首次利用清除DPPH和ABTS+自由基能力的方法检测猫豆的石油醚部位具有一定的抗氧化活性,且呈现良好的线性关系。
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