论文部分内容阅读
卤醇脱卤酶可以催化合成具有光学纯的环氧化物及β-取代醇等一类高价值手性药物中间体。卤醇脱卤酶的高效重组表达及纯化可以更好地促进该酶的应用。同时,针对卤醇脱卤酶在实际应用中的局限性,如对某些特定反应的低催化活性以及低立体选择性等,需对酶进行合理改造,以扩大其应用范围。为此,一种方便,灵敏的高通量筛选方法是非常必要的。通过PCR扩增,将编码卤醇脱卤酶的基因克隆至pBAD表达载体中,经测序鉴定后,将其转入大肠杆菌TOP10中,对其重组表达条件进行优化,以提高蛋白表达量。同时,对该酶在已构建好的