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质粒介导的喹诺酮耐药(PMQR)是近年来的研究热点,其中oqxAB基因是近年来被归入PMQR的新基因,其编码的外排泵可同时介导细菌对氯霉素、氨苄西林、喹乙醇和喹诺酮等多种抗生素耐药,目前关于oqxAB基因的报道较少。本研究旨在调查大肠杆菌对兽医临床常用抗生素的耐药状况及PMQR的流行情况,并对oqxAB基因的传播机制进行初步研究,为指导临床合理使用抗菌药物、减少细菌耐药性的出现和传播提供理论依据。 本研究采用琼脂稀释法测定了143株大肠杆菌对18种抗菌药物的敏感性,结果显示,菌株对四环素、萘啶酸、氨苄西林的耐药率最高,分别为96.50%、95.80%和98.6%;对阿米卡星最为敏感,耐药率仅17.48%,对头孢曲松(42.66%)、大观霉素(62.94%)、庆大霉素(62.94%);对氟喹诺酮药物的耐药程度相近,依次为左氧氟沙星(81.82%)、恩诺沙星(88.11%)环丙沙星(90.91%);对氟苯尼考和氯霉素的耐药率达到88.11%和92.61%;对喹乙醇和乙酰甲喹的耐药率分别为75.52%和59.44%;对其他药物如多西环素、链霉素、卡那霉素、替米考星的耐药率依次为90.91%、83.22%、81.82%、93.01%。 采用PCR方法对菌株进行PMQR流行性检测,PCR结果显示,qnrB、qnrS、aac(6)-Ib-cr、oqxA均检测到,分别有15株(10.49%)、27株(18.88%)、45株(31.47%)和64株(44.76%),而qnrA、qnrC、qnrD和qepA基因没有检测到。以oqxA的检出率最高。64株oqxA阳性菌中有58株同时携带oqxB基因。有93株菌至少携带一种PMQR基因。44株菌株携带两个或两个以上PMQR基因,基因共同携带的方式有11种。 58株oqxAB阳性菌接合转移共得到19株接合子,接合子与受体菌相比,对环丙沙星的MIC值升高了4~256倍,对恩诺沙星的MIC值升高了2~16倍,对喹乙醇的MIC值升高了2~8倍,对氯霉素的MIC值升高了2~256倍,对氨苄西林和萘啶酸的MIC分别上升了2~128倍和2~32倍。接合子对氯霉素、氨苄西林和萘啶酸的耐药率分别为52.63%、78.95%和52.63%,对喹乙醇耐药率为78.95%;接合子与受体菌相比,对恩诺沙星和环丙沙星的MIC值有所升高,但并未达到耐药程度。对接合子质粒复制子分型得到的主要是IncF型复制子。 58株oqxAB阳性菌株中有14株在oqxAB的上游检测到IS26。对19株菌的ERIC-PCR实验表明,阳性菌株遗传背景复杂,提示广东省大肠杆菌之间oqxAB基因的传播以水平传播为主。 本研究对大肠杆菌质粒介导的喹诺酮类耐药基因进行调查研究及开展对oqxAB基因传播机制的探讨,是对兽医临床喹诺酮类耐药基因研究的重要补充,具有积极的意义。