ET-1刺激培养大鼠皮层神经元释放一氧化氮的研究

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目的:确定内皮素(endothelin,ET)-1能否直接诱导皮层神经元释放一氧化氮(Nitric oxide,NO),以及所经过的ET受体亚型。 方法:神经元培养取自SD乳鼠(出生24h内)大脑皮层细胞,体外原代培养7d用于实验。首先以不同浓度的ET-1(10 nM,100 nM)刺激神经元,在加药前,加药后30 min和加药后6h收集培养基,以硝酸还原酶法检测培养基中NO的浓度。接着,在10 nM ET-1处理的同时,分别加入BQ123(选择性ET_A受体拮抗剂)、BQ788(选择性ET_B受体拮抗剂)、PD145065(非选择性ET受体拮抗剂),作用6h后检测培养基中NO浓度。 结果:10nM及100 nM ET-1作用6 h后,神经元培养液中NO的浓度明显高于对照组(P值分别为0.029,0.015),而二者之间则没有显著性差异(P=1.000)。BQ788和PD145065可分别完全阻断ET-1刺激神经元释放NO的作用,使其培养液中NO浓度保持与对照组一致水平(各P>0.05),而明显低于单独ET-1组(各P<0.05)。BQ123对ET-1刺激神经元释放NO无影响,其培养液中NO浓度与单独ET-1组相近(P=0.987),均高于对照组(各P<0.05)。 结论:外源性ET-1可通过ET_B受体直接诱导培养SD大鼠大脑皮层神经元释放NO。
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