原花青素对小鼠视网膜光化学损伤的保护作用

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目的观察小鼠视网膜光化学损伤后病理形态及凋亡相关指标的改变,探讨原花青素(proanthocyanidins, PC)对小鼠视网膜光化学损伤(retinal photochemical injury)的保护和拯救作用。方法1.昆明小鼠50只,随机分为A组(正常对照组)、B组(光化学损伤模型组)和C组给药组[分为C1组(仅造模前给药组),C2组(造模前后给药组)和C3组(仅造模后给药组)],每组均有10只小鼠。2.造模方法:自制光损伤箱,箱内6个面均装有36 W的冷光源荧光灯共20个,光照度为(16473.5±402.8)lx。动物分光照前先暗适应12 h,之后光照12 h,连续3个循环,总光照时间为36 h。在光照全过程中,箱内温度保持在28~32℃。C组小鼠按400mg/kg灌胃给原花青素混悬液;所有动物于造模后第7天处死并取出眼球行石蜡包埋切片。3.部分石蜡切片进行HE染色,光镜下观察视网膜形态学改变,并对视网膜外核层厚度进行测量。4.部分石蜡切片进行凋亡原位检测(TUNEL法)标记凋亡细胞,并计算凋亡指数(AI)。5.统计学分析用SPSS 13.0统计软件进行,计算各组平均值x和标准差S,两组间比较用方差分析。结果1.正常小鼠视网膜内外节排列整齐,分界清晰,外核层排列紧密,染色均匀,细胞形态规整。2.视网膜光化学损伤模型成功建立,HE染色形态学观察发现:视网膜各层结构疏松,内外节破坏严重,外核层明显变薄,仅留1-2层。3.给药组中,C2组视网膜十层结构较完整,分界较清晰,外核层细胞排列基本整齐,内外节轻度肿胀。C1组视网膜内外节轻度肿胀,间隙增宽,外核层间隙稍增宽。C3组视网膜结构较C1组内外节肿胀明显,间隙增宽,外核层细胞部分受到损害,排列紊乱。4.TUNEL染色正常小鼠视网膜呈阴性;光化学损伤组在外核层有大量阳性着染细胞核,原花青素给药组仅见少量阳性着染细胞核,C2组几乎没有阳性着染细胞核。5.统计结果显示,视网膜外核层厚度及凋亡指数的结果,组组间比较均有统计学意义(p<0.05)结论原花青素能保护和拯救光化学损伤后的视网膜,并能显著抑制视网膜光化学损伤中感光细胞的凋亡。
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