近年来,高尿酸血症的患病率持续增加。但是高尿酸血症在早期阶段无明显症状,所以患者不能及时察觉并加以治疗,将会导致痛风、高血压、肾结石等疾病的发生。其中引起痛风疾病的主要原因是人体内较高浓度的尿酸会使尿酸盐在关节和肾脏部位堆积,导致关节畸形、皮肤破溃、肾脏损伤,甚至威胁到生命。因此为了早期预警和诊断高尿酸血症及痛风,我们开发了一种可以在院外进行样本采集、廉价、存储运输便捷及快速定量唾液中尿酸含量的新方法,称为人体唾液中尿酸干纸片法(Dried spot method of uric acid in human saliva,DSM-UHS)。本研究选用双圈定性滤纸,把它裁剪成直径为5mm的圆形滤纸片,滴加内标和唾液后放在室温下晾干。用Li2CO3溶液萃取干燥后的滤纸片,蒸干萃取液,复溶后进样分析。以磷酸盐缓冲液(74 mmol/L,pH 2.2):甲醇=98:2为流动相,使用 Inertsil ODS-3(250mm×4.6mm,4μm)色谱柱,流速1.0 mL/min,检测波长为284 nm,分析时间为7 min。尿酸在2-300 μg/mL范围内线性关系良好y=0.1129x+0.3872(R2≥ 0.9998),最低检测限(LOD,S/N=3)为 5μg/mL,精密度范围在0.29-4.06%。人体唾液中尿酸的含量在一天内(8:00-16:00)无明显波动,所以最佳采集时间为8:00-16:00;唾液尿酸干纸片在20℃和40℃下保存24 h及5天的CV%<8.94%,表明唾液尿酸干纸片中的尿酸具有良好的稳定性。健康志愿者和痛风患者的平均加样回收率分别为96.16%和99.20%;日内、日间精密度范围分别在 1.08-4.30%,1.06-3.78%和 1.25-4.66%,3.62-10.86%,均满足生物样品测定的要求。我们使用该方法检测了 61名志愿者(46名健康志愿者;15名痛风患者)唾液中尿酸的含量,其中健康男性志愿者尿酸的平均含量为22.28±12.59 μg/mL,健康女性志愿者尿酸的平均含量为12.67±9.64 μg/mL,健康志愿者和痛风患者尿酸的平均浓度分别为17.48±12.11 μg/mL和47.08±14.57μg/mL。结果表明,唾液中尿酸含量与性别相关,健康男性尿酸含量大于健康女性(p<0.01),并且痛风患者尿酸含量明显高于健康人,在统计学中具有极显著性差异(p<0.0001)。随后我们检测了 61名志愿者血液中尿酸的含量,并将他们的血尿酸值和唾液尿酸含量进行分析,结果显示出人体唾液和血液中尿酸含量呈正相关性(r=0.6243,p<0.0001),表明人体唾液中尿酸的含量可间接地反映血液中尿酸的含量,为使用非侵袭性唾液尿酸含量估测血尿酸值提供了有力数据。本研究开发了一种检测人体唾液中尿酸含量的新方法,为今后研制人体唾液中尿酸干纸片法检测试剂盒的研究提供了有效的基础数据。