目的复制并改进肺泡巨噬细胞胞葬功能障碍体外模型,应用Nrf2通路激动剂、Nrf2通路抑制剂及联合用药干预,通过检测胞葬率、细胞上清炎症因子、胞葬相关因子、Nrf2通路相关蛋白、m RNA水平等指标,探究补肺益肾方对肺泡巨噬细胞胞葬功能的影响,及与Nrf2通路的关系,为深入研究补肺益肾方治疗慢性炎症的机制提供可参考的实验思路和方法。方法1.Alamar Blue法检测CSE、多个浓度NI、NA对肺泡巨噬细胞NR8383生存能力的影响。2.流式细胞术检测肺泡上皮细胞RLE-6TN的凋亡率、肺泡巨噬细胞NR8383胞葬率。3.ELISA法检测补肺益肾方含药血清对各组肺泡巨噬细胞NR8383上清中炎症因子、胞葬相关因子（GAS6、MFGE8）水平。4.荧光定量PCR法测定补肺益肾方含药血清对各组肺泡巨噬细胞NR8383 Nrf2、Keap1、HO-1、Rac1 m RNA的水平。5.Western Blot法检测补肺益肾方含药血清对各组肺泡巨噬细胞NR8383的相关通路蛋白Nrf2、Keap1、HO-1、Rac1的表达。结果1.Alamar Blue法检测细胞活力:（1）与CT组相比,10%CSE作用后,各个时间点（6h、12h、24h、48h）NR8383细胞活性的影响均无统计学差异（P＞0.05）。（2）与CT相比,各个浓度的NI、NA对肺泡巨噬细胞NR8383时效（6h、12h、24h、48h）的生存活力的影响均无统计学差异（P＞0.05）。2.流式细胞术检测胞葬率:（1）与CT组相比,CSE作用6h后,M组胞葬功能下降,但无统计学差异（P＞0.05）,CSE作用12h、24h、48h后,M组胞葬功能均明显著下降（P＜0.05,P＜0.01）。（2）与CT组相比,M组胞葬率显著降低（P＜0.01）,与M组相比NA组胞葬率明显升高（P＜0.05）,NI组胞葬率无统计学差异（P＞0.05）。（3）与CT组相比,M组胞葬率显著降低（P＜0.01）;与M组相比,BYF组胞葬率显著升高（P＜0.01）;与BYF组相比,BNI组胞葬率明显降低（P＜0.05）。3.ELISA结果显示:（1）与CT组相比,M组TNFα水平显著升高（P＜0.01）,GAS6水平明显降低（P＜0.05）,MFGE8水平无明显差异（P＞0.05）;与M组相比,NI组TNFα、GAS6、MFGE8水平无明显差异（P＞0.05）;与M组相比,NA组TNFα明显降低（P＜0.05）,GAS6、MFGE8水平显著升高（P＜0.01）。（2）与CT组相比,M组TNFα水平显著升高（P＜0.01）,GAS6水平明显降低（P＜0.05）,MFGE8水平无明显差异（P＞0.05）;与M组相比,BYF组TNFα水平显著降低（P＜0.01）,GAS6、MFGE8水平显著升高（P＜0.01）;与BYF组相比,BNI组TNFα、GAS6、MFGE8水平均明显降低（P＜0.05,P＜0.01）。4.荧光定量PCR结果显示:（1）与CT组相比,M组Nrf2、HO-1 m RNA水平显著升高（P＜0.05,P＜0.01）,Rac1 m RNA水平显著降低（P＜0.01）,Keap1m RNA水平无明显差异（P＞0.05）;与M组相比,NI组Nrf2 m RNA水平明显降低（P＜0.05）,Keap1 m RNA水平明显升高（P＜0.05）,NA组HO-1、Rac1m RNA水平显著升高（P＜0.01）;（2）与CT组相比,M组Nrf2、HO-1 m RNA水平显著升高（P＜0.05,P＜0.01）,Rac1 m RNA水平明显降低（P＜0.05）,Keap1m RNA水平无明显变化（P＞0.05）;与M组相比,BYF组Nrf2、HO-1、Rac1m RNA水平显著升高（P＜0.05,P＜0.01）,Keap1 m RNA水平明显降低（P＜0.05）;与BYF组相比,BNI组Nrf2、Rac1 m RNA水平明显降低（P＜0.05）,Keap1、HO-1 m RNA水平显著升高（P＜0.05,P＜0.01）。5.Western Blot结果显示:（1）与CT组相比,M组Keap1、Rac1表达显著降低（P＜0.05,P＜0.01）,Nrf2、HO-1表达显著升高（P＜0.05,P＜0.01）;与M组相比,NI组Nrf2、Keap1、HO-1、Rac1表达均无明显差异（P＞0.05）;NA组Nrf2、HO-1、Rac1表达显著升高（P＜0.05,P＜0.01）,Keap1表达显著降低（P＜0.01）。（2）与CT组相比,M组Nrf2、HO-1蛋白表达显著升高（P＜0.01）,Rac1蛋白表达明显降低（P＜0.05）,Keap1蛋白表达无明显差异（P＞0.05）;与M组相比,BYF组Nrf2、HO-1、Rac1蛋白表达明显升高（P＜0.05）,Keap1蛋白表达明显降低（P＜0.05）;与BYF组相比,BNI组Nrf2蛋白表达明显降低（P＜0.05）,Keap1蛋白表达明显升高（P＜0.05）。结论1.补肺益肾方对香烟烟雾导致的肺泡巨噬细胞胞葬功能障碍有改善作用。2.补肺益肾方可提高吞噬蛋白Rac1表达、胞葬辅助因子水平、减少炎症因子TNFα分泌。3.补肺益肾方可通过干预Nrf2信号通路改善香烟烟雾刺激所导致的肺泡巨噬细胞胞葬功能障碍。