快速加减压对大鼠肝脏糖皮质激素受体作用的研究

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潜艇在平时和战时均有可能因意外事故而沉没,为了保存艇内有生力量,必须组织潜艇艇员水下脱险。快速上浮脱险是一种新型先进的单人脱险技术,它应用不减压潜水的原理,艇员经过脱险舱快速加压,待脱险舱内压力与艇外压力平衡后,艇员离艇,迅速上浮出水,在水面等待援救。这种技术具有操作简单,脱险深度大、潜水疾病发生率小等优点。目前人体试验最大脱险深度为183m。以往的研究结果显示,模拟快速上浮后潜水员均存在不同程度的应激反应和表现,心电图显示ST段压低,血浆强啡肽、β-内啡肽、CRH和ACTH水平升高,但其有关的深入改变研究甚少。糖皮质激素受体(GR)是决定靶细胞对激素反应性变化的关键大分子,其表达数量及亲和力的异常是多种疾病和病理生理反应的基础,而目前GR在脱险应激中的变化规律尚未见报道。本研究的主要目的是:1. 建立快速加减压大鼠模型;2. 观察快速加减压暴露后肝脏糖皮质激素受体(GR)mRNA表达的变化规律;3. 结合组织病理和血清生化,探讨机体对快速加减压的应激性生理或病理反应。通过上述研究,从整体和细胞水平探讨快速加减压后机体应激性反应的机制,并为大深度快速上浮脱险医学保障提供理论依据。结果显示:1. 采用健康成年SD大鼠,当以11.8m/s的速度匀速加压至2.0MPa表压并停留2s,随即以2.5m/s的速度匀速减至常压时,动物出舱后一般行为学无明显改变,心前区Doppler气泡音均为0级,说明建立了模拟艇员快速上浮脱险的快速加减压大鼠模型。 <WP=7>2. 快速加减压后1h大鼠肝脏乳酸脱氢酶(LDH)水平增高(P<0.05),病理切片提示肝脏中央静脉瘀血,其周围肝细胞呈脂肪变性,轻重不等,说明快速加减压暴露后肝脏有炎性损伤,提示出现了应激反应。3. RT-PCR检测肝组织GRmRNA,发现大鼠快速加减压暴露后1h肝组织GRmRNA水平显著降低,与正常对照组相比,差别有显著性(p<0.01);暴露后2h、4h GRmRNA水平上升,但仍低于正常对照组水平(p<0.01);至暴露后24h,GRmRNA水平基本恢复到正常水平(p>0.05)。4. 采用β-actin作为内参照,对电泳条带进行密度定量,结果显示:快速加减压后1h GR条带灰度值仅为β-actin条带灰度值的2.8%;2h增高至9.3%;4h为15.8%;与对照组相比,均有显著性差异(p<0.05)。24h组GR条带灰度值最高,约为β-actin的63.5%,与对照组(60.3%)相比无显著性差异。以上结果表明,快速加减压暴露可引起大鼠显著的应激反应,导致血清LDH水平升高,肝脏GRmRNA表达水平快速下降;应激过程中大量产生的糖皮质激素可下调其相应受体GR的转录合成,以此抑制多种炎性因子过度表达,防止细胞损伤。这种分子水平的调控平衡是应激中细胞维持正常功能的基础。
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