白木香(Aquilaria sinensis(Lour.)Spreng.)是我国“国药”沉香的药源植物,我国野生白木香资源破坏严重,已近濒危。白木香叶作为可持续性利用资源,叶片中的多种药用成分已被成功鉴别与提取。根据相关文献报道,白木香叶中含有丰富的芒果苷,而且芒果苷具有抗炎、抗肿瘤、抗氧化、降低血糖血脂等作用。由于芒果苷在水中溶解度较差、生物利用度不高,致使芒果苷在应用上受到限制。目前,芒果苷的相关研究主要集中在药理活性上,关于芒果苷的提取、分离、纯化和改善水溶性的相关研究较少。本研究分析了白木香叶中芒果苷含量的时空变化规律,对白木香叶中的芒果苷进行了高效的提取、分离、纯化,并利用超临界反溶剂(SAS)技术改善其水溶性,提高其生物利用度,研究结果如下:(1)本文对三亚地区和茂名地区的不同树龄、不同月份、不同成熟度以及不同储存时间的白木香叶中总黄酮、芒果苷的变化量进行了监测。结果表明,总黄酮含量最低值出现在1月份(8.02%),最高值出现在7月(10.83%);芒果苷含量最高值出现在5月份(3.30%),最低值出现在1月(2.24%),芒果苷产量最低值出现在1月份(11.68 mg-单片叶),全年最高值是5月份(18.85 mg-单片叶)。新生嫩叶中的芒果苷含量(3.69%)明显高于成熟叶(2.44%)、过熟叶(1.60%)和黄落叶(0.53%);一年生白木香叶片中的芒果苷在两地所有树龄级中含量最高,其他树龄的白木香叶中芒果苷含量差异不明显;从两地种植情况来看,三亚地区的芒果苷全年平均含量(2.92%)要高于茂名地区(2.68%);两地白木香叶片中芒果苷含量随月份变化呈双峰分布,在三亚地区的最高峰出现5月(3.30%),茂名地区为3月(3.16%)全年的第二个芒果苷含量高峰在十一月(三亚市)、九月(茂名市),分别为3.04%和2.88%;从储存时间来看,在避光、干燥、低温的条件下,一年储存期的白木香叶中芒果苷含量变化均≤0.02%。(2)本文采用胶束法,通过微波超声提取了白木香叶中的芒果苷,并用大孔树脂进行了初步纯化,然后又通过反溶剂沉淀法对芒果苷进行了进一步的纯化。实验结果如下:利用单因素法和响应面法进行了提取工艺优化,并进行了实验验证,最佳条件为:烷基糖苷的质量分数0.9%、提取时间7 min,微波超声功率408 W,料液比1:44,芒果苷提取率最大可达到3.229%(32.229 mg/g),与模型预测值误差为0.9%;大孔树脂纯化条件为:选择2.5 BV的AB-8大孔树脂柱,进液速率为1 ml/min,上样完全后静置120 min,待吸附平衡后,用40%的乙醇溶液洗脱13 BV,并通过实验验证测得芒果苷的纯度为73%,得率为57.31%。通过单因素考察了沉积时间、沉积温度、芒果苷粗品溶液浓度、溶剂与反溶剂体积比等4个因素对反溶剂沉淀法纯化后的芒果苷纯度和得率的影响,确定了最佳纯化工艺:沉积时间为3 min、沉积温度为35℃、芒果苷粗品溶液浓度为35 mg/mL、溶剂与反溶剂体积比为1:15,通过实验验证,得到的芒果苷纯度为98.13%,得率为 81.34%。(3)本文利用超临界反溶剂(SAS)技术成功制备了芒果苷超微粉,并通过正交设计(OAD)进行了工艺优化。实验结果如下:各个因素为对芒果苷的溶解度的影响按顺序为:结晶压力>芒果苷溶液浓度>结晶温度>进液流速;当结晶压力、结晶温度、芒果苷溶液浓度、进液流速分别为20 MPa、51℃、23 mg/mL和10 mL/min时,获得的芒果苷超微粉的溶解度最大,通过验证试验,得到芒果苷超微粉最大的溶解度为0.6413 mg/mL,粒径为 532.8 nm。(4)本文分别对芒果苷原药和芒果苷超微粉进行了理化性质表征。结果表明,芒果苷原药和芒果苷超微粉的化学结构相同,没有发生变化,芒果苷超微粉82.43%属于无定形态结构,结晶度为12.57%;芒果苷超微粉的溶解度也高于原药,在水中的饱和溶解度为641 μg/mL(芒果苷原药为146 μg/mL),约为原药的4.39倍;人工胃液中的饱和溶解度为206μg/mL(芒果苷原药为98 μg/mL),约为原药的2.1倍;在人工肠液中的饱和溶解度为119 μg/mL(芒果苷原药为53 μg/mL),约是原药的2.25倍。体外释放研究表明,芒果苷超微粉在人工胃液中的释放约是原药的1.19倍,在人工肠液中的释放约为原药的1.30倍。(5)通过芒果苷原药和芒果苷超微粉对DPPH自由基清除能力、对ABTS自由基清除能力和对Fe2+的还原能力进行实验对比。结果表明,芒果苷超微粉的抗氧化能力高于芒果苷原药。DPPH自由基清除力是原药的1.66倍,是维生素C的1.45倍;当浓度达到0.4 mg/mL时,清除ABTS自由基能力是原药的1.33倍,接近维生素C的清除率;对Fe2+还原能力是原药的2.77倍。(6)本文考察了大鼠进行芒果苷超微粉和芒果苷原药的灌药后,芒果苷在大鼠体内的各组织中含量的分布情况和生物利用度。结果表明:从各组织的吸收率看,芒果苷超微粉的吸收率优于芒果苷原药;从组织中药物含量看,芒果苷超微粉的大鼠在心脏中的药物含量最大值是原药的1.61倍、在肝脏中的药物含量的最大值是原药的1.63倍、在脾中的药物含量的最大值是原药的2.27倍、在肺中的药物含量的最大值是原药的1.99倍、在肾中的药物含量的最大值是原药的1.69倍。此外,体内药动学研究表明,芒果苷超微粉体内生物利用度与原药相比提高了 2.07倍。