【摘 要】
:
应用Marc-145细胞扩增猪繁殖与呼吸综合征福州株病毒(PRRSV FZ),根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)已发表的核苷酸序列,设计了一对特异性引物(P1/P2),用RT-PCR的方法扩增PRR
论文部分内容阅读
应用Marc-145细胞扩增猪繁殖与呼吸综合征福州株病毒(PRRSV FZ),根据猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)已发表的核苷酸序列,设计了一对特异性引物(P1/P2),用RT-PCR的方法扩增PRRSV FZ株的全长糖基化囊膜蛋白基因(ORF5),将扩增产物连接到pMD 18 simple T Vector中并转化入大肠杆菌DH5α中,筛选阳性重组质粒进行序列测定与分析。结果表明,PRRSV FZ株与AY885248.1株的ORF5基因核苷酸的同源为100%,与BJ-4株的核苷酸同源性为99.5%,与美洲株VR-2332的核苷酸同源性为99.3%,而与欧洲型(LV)毒株的同源性则为27.1%,因此此株病毒属于美洲型毒株。阳性重组的质粒克隆到原核表达载体pGEX-6p-1(+)上,筛选阳性克隆进行酶切与序列鉴定,结果表明重组表达载体构建成功。将鉴定为阳性的重组表达质粒转化入表达菌E.coli BL21中,鉴定为阳性者用IPTG进行诱导表达,原核表达产物通过SDS-PAGE电泳检测和Western Blotting分析表达产物特性,结果表明表达的融合GP5蛋白分子量为48.5 kDa,表达产物以包涵体的形式存在,重组蛋白与PRRSV单克隆抗体具有良好的免疫反应原性。
其他文献
猪圆环病毒Ⅱ型(Porcine circovirus type 2,PCV2)所引起的疾病是当今养猪业中严重关切的重大传染病之一。它能造成猪的生长缓慢,饲料报酬降低,同时侵害猪的免疫系统,导致机
目的硒的抗肿瘤作用已在广泛的研究中得到证实。肿瘤的血管为肿瘤细胞提供生长所必须的氧气、营养和生长因子等。血管生成素2(Angiopoietin-2,Ang-2)、血管内皮生长因子(Vascular Endothelial Growth Factor,VEGF)和血小板衍生因子(Platelet-Derived Growth Factor,PDGF)是促进血管生成的重要因子。为了探索硒在体内的抗肿瘤
卵母细胞和胚胎冷冻技术在家畜遗传资源保存方面具有广泛和潜在的应用价值。本试验用OPS管或GMP管对牛卵母细胞玻璃化冷冻和用麦管对胚胎程序化冷冻进行研究。在冷冻时,对基
本实验应用免疫SPA菌体花环法、间接ELISA法、免疫酶组织化学法和组织化学染色法全面系统地研究了雏鸡饲喂益生素及应用益生素雏鸡ND疫苗免疫和NDV攻击后,其外周血液和免疫器
老师需要以求同道者的心态面向听众,他必须有求证原来的“道”是否精准,是否有新的变化,对未来解释是否合理,是否有新的问题等等,其意在于共同将道精练到更加具有真理的高度
介绍了在实时机器人多任务控制系统中,双口RAM技术的三种组成方案,着重叙述了基于多总线的双目RAM方案。同时阐述了多总线双口RAM的地址伪映射原理、仲裁逻辑原理和组成。最后
八尾绿皮革造型艺术作品解析八尾绿先生是日本著名皮革造型艺术家,她从1953年开始从事皮革造型艺术研究与创作,现已有五十多年。1960年她在日本东京组织成立了“彩季会皮革工
猪流感是由猪流感病毒(Swine influenza virus, SIV)引起的不同日龄、性别和品种猪只的一种急性、热性和高度接触性的呼吸道传染病,其临床上以突发、高热、咳嗽、呼吸困难、