【摘 要】
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本文成功建立了一种高灵敏度和高特异性的间接竞争酶联免疫吸附分析法(ELISA),用以分析不同水环境(自来水,饮用水,地表水以及污水)中的吲哚美辛含量。吲哚美辛是一种常用的非
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本文成功建立了一种高灵敏度和高特异性的间接竞争酶联免疫吸附分析法(ELISA),用以分析不同水环境(自来水,饮用水,地表水以及污水)中的吲哚美辛含量。吲哚美辛是一种常用的非甾体抗炎镇痛药(NSAID)。将吲哚美辛与牛血清白蛋白和卵清蛋白相结合制成免疫原和包被抗原。使用免疫原对两只成年新西兰大白兔进行5次免疫后取得吲哚美辛抗血清,以灵敏度,特异性,精密度,准确性和稳定性作为标准筛选出最佳抗体。在优化的实验条件下,标准曲线建立在0.01-10ng/mL( 0.01,0.03,0.1,0.3,1.0,3.0,10 ng/mL)的浓度范围内。在两周时间内连续作出10条标准曲线,IC50值(标准曲线中吸光度抑制至最大吸光度值的50%时所对应的待测物浓度)在0.10 - 0.25 ng/mL,最低检出限(DL,S/N=3)为0.01 ng/mL。ELISA法的特异性由交叉反应表示,在所测物质中,作为吲哚美辛的一种前体药物,阿西美辛与吲哚美辛结构相似,因此它与吲哚美辛抗体的交叉反应达到92.3%。然而其他非甾体抗炎镇痛药与吲哚美辛抗体的交叉反应值很小。精密度,准确性和稳定性由加标实验确定,得到回收率在98%-123%。本实验也采用HPLC法来测定不同水样中的吲哚美辛,将其测定结果与ELISA法比较,两种方法保持良好的一致性,相关系数达到0.988。
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