野生型EphB6基因过表达与大肠上皮细胞恶性转化及演进之间关系的研究

来源 :哈尔滨医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:dlufey
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Eph受体是酪氨酸激酶受体家族中最大的一个亚群。Eph受体作为细胞效应信号通路的重要组成部分,可以接受外界刺激并进行传导,参与细胞生长、增殖、分化和胚胎发育。  EphB受体是Eph受体的一个亚型(B-亚型,主要与B-配体结合)。EphB受体拥有多种重要功能,它在调控正常细胞形态、细胞粘附能力、迁移运动能力[1,2]及血管生成[3,4]中起作用,并且参与调控机体内组织成型、器官发育、胰岛素分泌、骨的代谢以及神经信号传导。现今研究发现,EphB受体的表达水平与多种肿瘤的发生发展转移等过程密切相关[5],EphB受体在肿瘤中或者呈现高表达,或者呈现低表达,但是始终以某种表达形式影响肿瘤的细胞增殖、恶性程度、侵袭力、转移能力及肿瘤的预后情况。  EphB6作为EphB受体的成员,不仅具有EphB受体的基本功能,而且其对药物干涉具有较好的亲和力[6]。有文献报道,EphB6在大肠癌中呈现高表达[7]。这为其成为大肠癌治疗的最佳靶点提供有利科学依据。  研究前期,导师于志伟教授以转基因鼠获得大肠腺瘤细胞模型IMCE为研究对象,构建野生型EphB6基因表达质粒(PcDNA3.1-WT-EphB6),转染IMCE细胞后,筛选并获得稳定过度表达野生型EphB6的转基因鼠大肠细胞模型。至此构建了大肠腺瘤细胞IMCE和过度表达野生型EphB6基因的IMCE细胞模型。前期试验已验证,转染载体PcDNA3.1的IMCE细胞与母细胞IMCE比较,在细胞生物学行为上无变化。  本研究以上述细胞模型为研究对象,进行细胞增殖实验和软琼脂集落形成实验,发现EphB6基因的过度表达可以导致大肠腺瘤IMCE细胞的增殖变快,软琼脂中集落的形成变大增多。通过细胞迁移实验发现EphB6基因的过度表达使腺瘤IMCE细胞的移动性变强,损伤修复加快。在裸鼠成瘤实验中,种植了过度表达野生型EphB6的IMCE细胞裸鼠,在2周内有肿瘤形成,肿瘤生长迅速。在6周左右,部分瘤体破溃。综上所述,大肠腺瘤细胞过度表达野生型EphB6后,细胞增殖能力、损伤修复能力、体内体外成瘤能力均有增强。推测EphB6基因的过度表达可能通过某种细胞信号传导途径加快大肠上皮细胞的恶性转化过程,具体机制有待进一步的实验加以验证。
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