月季是世界上最重要的观赏植物之一,也是研究木本园艺植物基因功能的良好对象。建立高效的再生体系和遗传转化体系是进行转基因育种的必要条件。本试验以单瓣月季花、‘月月粉’、‘珊瑚巴比伦眼睛’和‘萨曼莎’的幼嫩叶片为外植体,筛选影响再生的相关因素,通过器官直接发生途径建立了‘珊瑚巴比伦眼睛’的再生体系;通过体细胞胚发生途径建立了‘珊瑚巴比伦眼睛’和‘萨曼莎’的再生体系;并以体细胞胚为受体,初步建立了‘萨曼莎’遗传转化体系。其主要研究结果如下:1.月季直接器官再生受基因型和暗培养时间的影响。‘珊瑚巴比伦眼睛’在MS+1.5 mg/L TDZ+0.05 mg/L NAA+30 g/L Suc+7.0 g/L Agar的培养基上暗培养12天后转入分化培养基,不定芽诱导率最高达到31.33%。2.月季体细胞胚可通过直接或者间接方式进行诱导,但同样受到基因型的影响。将在MS+3.0 mg/L 2,4-D+0.05 mg/L KT+30 g/L Glu+3.0 mg/L Gel诱导得到的‘珊瑚巴比伦眼睛’的愈伤转接至MS+4.0 mg/L KT+30 g/L Glu+3.0 g/L Gel的培养基上可诱导出体细胞胚,诱导率为3.81%;‘萨曼莎’在MS+0.05 mg/L KT+2.0 mg/L 2,4-D+30 g/L Glu+3.0 g/L Gel的培养基上体细胞胚诱导率最高,为24.61%。3.在培养基中添加低浓度的DNA甲基化抑制剂可以提高月季体细胞胚的诱导率,而高浓度显著抑制体细胞胚的发生。在培养基中添加0.01μmol/L 5-Azad C或者0.1μmol/L Zebularine可以显著提高‘萨曼莎’的体细胞胚诱导率。4.‘珊瑚巴比伦眼睛’体细胞胚仅能在MS+1.5 mg/L ZT+0.25 mg/L NAA+0.1mg/L GA₃+30 g/L Glu+3.0 g/L Gel的培养基上缓慢增殖。‘萨曼莎’的体细胞胚在MS+1.0 mg/L 2,4-D+0.1 mg/L TDZ+30 g/L Glu+3.0 g/L Gel培养基上增殖效果最佳,增殖系数约为3.57。同时ABA的使用能够促进体细胞胚的成熟,使体细胞胚向芽状胚转变。5.‘珊瑚巴比伦眼睛’在1/2MS+1.0 mg/L 6-BA+0.005 mg/L NAA+0.1 mg/L GA₃+30 g/L Suc+3.0 g/L Gel培养基上分化率最高,为14.81%;‘萨曼莎’在MS+1.0mg/L 6-BA+0.1 mg/L TDZ+0.005 mg/L NAA+0.1 mg/L GA₃+30 g/L Suc+3.0 g/L Gel培养基上的分化效果最好,为81.63%。6.以‘萨曼莎’体细胞胚为受体,用OD值=0.6的农杆菌菌液侵染30min,然后共培养3天,共培养培养基中添加150μmol/L AS,GUS基因的瞬时表达率可达到47.22%。