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蝴蝶兰具有花大色艳、花型别致,花姿高雅、花期长等特性,是兰科植物中栽培最广泛、最受欢迎的种类之一。但由于以往杂交育种所选用的亲本缺少香味遗传因子,育成的蝴蝶兰没有香味,这对习惯欣赏传统国兰“色、香、韵”的国人而言,难免感到美中不足。本试验选用的蝴蝶兰(Phalaenopsis hybrid)是由郑州市花卉工程技术研究中心选育的杂交蝴蝶兰(Phalaenopsis hybrid)天香L04,该种是蝴蝶兰属(Phalaenopsis )、湿唇兰属(Hygrochilus)与兰属(Cymbidium)杂交种。天香L04除了具有蝴蝶兰的一般特征外,其花期更长,整个花序可开放4-5个月,且有独特的清香味,具有较高的观赏价值和市场应用前景。为加速该杂交蝴蝶兰的市场应用,特开展了其组织培养技术体系的研究。本试验采用带腋芽的花梗段和幼嫩花梗作为外植体分别诱导丛生芽和原球茎,继而进行增殖培养,最后诱导生根。试验采用正交试验和单因素设计,对试验结果进行方差分析及多重比较,确定了杂交蝴蝶兰天香L04组织培养技术体系,研究结果如下:1杂交蝴蝶兰天香L04组织培养的适宜条件为温度25±1℃、光照时间12h/d、光照强度2200lx、相对湿度70%。2花梗丛生芽诱导:最佳诱导培养基1/2MS+6-BA10mg/L+KT1.0mg/L+NAA0.05mg/L+ AC0.5ml/L,30天诱导率可达99%。3丛生芽增殖:最佳培养基为1/2MS改良1+6-BA7mg/L+KT1.5mg/L+蛋白胨2g/L,平均每外植体60天可增殖5.12个芽,丛生芽培养基的优化条件为:AC浓度为1g/L,CM浓度为30ml/L,白糖使用量为25g/L。4生根:最佳培养基为1/2MS改良2+NAA0.3mg/L+IBA0.7mg/L+AC1.5g/L,平均每个单苗60天可生根3.87(条)。壮苗培养基的优化条件为:蛋白胨浓度为1.5g/L,土豆浓度为30g/L,白糖使用量为25g/L。5花梗诱导原球茎(PLB):最佳培养基为:1/2MS+KT0.3mg/L+6-BA5mg/L+NAA0.05 mg/L+AC1.0g/L,30天后诱导率可达69.3%。6 PLB增殖:最佳培养基为1/2MS改良1 +6-BA3mg/L+KT0.5mg/L +蛋白胨1.5g/L,平均每原球茎块60天可增殖7.99倍。PLB增殖培养基的优化条件为:AC浓度为1.0g/L,CM浓度为40 ml/L,白糖使用量20g/L。7 PLB分化及生根:最佳培养基为1/2MS改良2+NAA0.5mg/L+IBA0.7mg/L +AC1.5g/L平均生根可达4.12(条)。壮苗培养基的优化条件为:蛋白胨浓度为1.5g/L,土豆浓度为30g/L,白糖浓度为25g/L。8 AC对防止外植体褐变有一定作用,腋芽诱导、丛生芽增殖、生根分别以AC0.5g/L、1g/L、1.5g/L为好,叶片PLB诱导、增殖分别以AC1.0g/L效果较优,PLB分化及生根以1.5g/L效果最好。9小苗在苔藓中生长最好,成活率可达100%。