论文部分内容阅读
甘油是一种常见的、非常重要的化工原料，它具有吸湿性强、水溶性高、高黏度高、冰点低的特点，且无毒，容易被微生物分解，被广泛应用到涂料、国防、油漆、造纸、烟草、纺织印染、化妆品、食品、医药等行业中。由于天然法、合成法生产甘油的种种局限，甘油的产量己无法满足需求，必须依靠大量进口，这种供不应求的局面还将长期存在。因此，以淀粉为原料，利用微生物发酵生产甘油的方法具有重要的现实意义，对发酵法生产甘油的研究也势在必行。利用正交试验，确定了淀粉糖化醪制备中液化过程的最佳工艺参数为：使用耐高温α-淀粉酶为液化酶时，其酶添加量为0.035g/100g淀粉淀粉，pH为5.5，液化温度为90°C，液化时间为3.5h。糖化过程的最佳工艺参数为：糖化酶β-淀粉酶的添加量为0.3g/100g淀粉，pH为4.5，糖化温度为58°C，糖化时间为2.5h。在此最优条件下制得的淀粉糖化醪的还原糖含量为22.6%。从环境中筛选出了一株具有发酵产甘油能力的酵母菌M0，通过紫外诱变处理，得到了一株高产甘油的酵母菌M1。构建包括26S rDNAD1/D2区序列分析和生理生化方法的鉴定技术，对该酵母菌进行了鉴定，通过6S rDNAD1/D2区序列分析并构建系统发育树发现，菌株M1与假丝酵母C.parapsilosis NRRL Y-12969T相似度为100%，因此可以鉴定M1为假丝酵母。进行生理生化试验后，根据酵母菌的特征与鉴定手册，试验证明菌株M1符合假丝酵母的特性，与26S rDNAD1/D2区序列分析结果相符。对筛选出的M1菌株的培养基及发酵条件进行了优化，首先确定了碳源、氮源、磷源，确定碳源为葡萄糖，氮源为尿素，磷源为玉米浆。其次确定各营养成分的含量，分别为葡萄糖浓度在180g/L、尿素浓度在2g/L、玉米浆浓度在0.4mL/L。最后，对甘油发酵条件进行了优化，结果显示，最优发酵条件为接种量为10%、亚硫酸钠添加量42%，发酵ph7.4、发酵温度30°C，甘油产量达到13.25g/L。