C/EBPα和C/EBPβ基因影响子宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭的研究

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目的:通过研究C/EBPα和C/EBPβ基因对子宫颈癌HeLa细胞增殖和侵袭能力的的影响,对深入了解其在子宫颈癌发生、发展过程中的作用提供新的线索,为子宫颈癌的诊断、治疗提供新的靶点和研究方向。  方法:1、分别抽提C/EBPα和C/EBPβ质粒,然后用脂质体法分别转染到子宫颈癌HeLa细胞。2、应用免疫荧光方法评价C/EBPα和C/EBPβ蛋白质表达水平。3、实验按干预因素不同分重组质粒组(转染pcDNA3.1-C/EBPα的HeLa细胞)、重组质粒组(转染pcDNA3.1-C/EBPβ的HeLa细胞)、空质粒组(转染pcDNA3.1的HeLa细胞)、对照组(未转染质粒的HeLa细胞)、用免疫组织化学的方法检测各组核蛋白Ki-67观察细胞增殖情况、用MTT观察细胞增殖情况、基质胶侵袭实验分析细胞迁移能力、扫描电子显微镜下观察细胞形态。  结果:1、免疫荧光结果显示:重组质粒组荧光蛋白质表达含量明显高于空质粒组和对照组,而空质粒组和对照组蛋白表达无差异。2、免疫组化Ki-67结果显示:重组质粒组Ki-67蛋白表达明显低于空质粒组和对照组,而空质粒组和对照组Ki-67蛋白表达无显著差异。3、MTT结果显示:重组质粒组增殖率明显低于空质粒组和未转染HeLa细胞组。转染C/EBPα组的吸光度值为0.21±0.01,转染空质粒组的吸光度值为0.24±0.01,未转染组的吸光度值为0.24±0.02,转染重组质粒组与空质粒组和未转染组比较差异有统计学意义(F=17.219,P=0.000),空质粒组和未转染组比较无统计学意义(P=0.155)。转染C/EBPβ组的吸光度值为0.38±0.12,转染空质粒组的吸光度值为0.59±0.17,未转染组的吸光度值为0.68±0.17,转染重组质粒组与空质粒组和未转染组比较差异有统计学意义(F=9.769,P=0.001),空质粒组和未转染组比较无统计学意义(P=0.230)。4、基质胶侵袭实验结果显示:重组质粒组与空质粒组和未转染组相比,细胞迁移能力减弱。转染C/EBPα组的细胞穿膜数为12±2.2,转染空质粒组的细胞穿膜数为39±3.2,未转染组的细胞穿膜数为39.6±2.6,转染重组质粒组与空质粒组和未转染组比较差异有统计学意义(F=171.00,P=0.000),空质粒组和未转染组比较无统计学意义(P=0.731)。转染C/EBPβ组的细胞穿膜数为16±2.3,转染空质粒组的细胞穿膜数为39±3.2,未转染组的细胞穿膜数为39.6±2.6,转染重组质粒组与空质粒组和未转染组比较差异有统计学意义(F=121.785,P=0.000),空质粒组和未转染组比较无统计学意义(P=0.731)。5、扫描电子显微镜结果显示:重组质粒组细胞表面微绒毛结构少于未转染HeLa细胞组,空质粒组细胞处于分裂状态。  结论:1、C/EBPα、C/EBPβ基因能抑制子宫颈癌HeLa细胞的增殖和迁移能力。
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