【摘 要】
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稻瘟病是水稻上重要的真菌病害,每年造成大量的粮食损失。其致病菌为稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)。研究和分析稻瘟病菌生长发育及致病的分子机制,对控制其发生和流行有着重
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稻瘟病是水稻上重要的真菌病害,每年造成大量的粮食损失。其致病菌为稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)。研究和分析稻瘟病菌生长发育及致病的分子机制,对控制其发生和流行有着重要的意义。近年来,在分子水平上关于稻瘟病菌的研究有着快速的发展,大量与致病有关的基因被发现。甘露糖转移酶(PMT)是真核生物中蛋白糖基化重要的催化剂,对蛋白的结构和多功能有着的重要作用。本文以酿酒酵母的氨基酸序列为根据,在稻瘟病菌上找到了3个致病相关基因。这3个基因编码的蛋白同属于PMT蛋白家族。系统进化树分析显示,PMT蛋白家族氨基酸序列在真菌中具有高度的保守性。根据同源重组原理,分别构建各基因对应的敲除载体,并通过原生质转化的方法导入到稻瘟病菌野生型菌株Guy11中,分别获得缺失突变体MoPMT1-7和Mo PMT1-8、MoPMT2-28和MoPMT2-30、MoPMT4-9和MoPMT4-22。研究表明,缺失PMT基因,稻瘟病菌分生孢子产量减少、形态异常,附着胞的形成受到影响,致病性也随之降低。进一步研究发现,PMT缺失突变体相比野生型菌株在菌丝生长方面有着不同程度的减缓,对外源胁迫因子更加敏感;此外PMT缺失突变体的细胞壁几丁质含量明显降低,完整性遭到破坏。
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