【摘 要】
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目的:由于原发性肝癌(HCC)存在突变、免疫逃避、抗原性弱、血供丰富等因素导致其死亡率、复发率较高,现有治疗方案并不能改善不能手术的患者的预后。近年来基因疫苗被运用在
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目的:由于原发性肝癌(HCC)存在突变、免疫逃避、抗原性弱、血供丰富等因素导致其死亡率、复发率较高,现有治疗方案并不能改善不能手术的患者的预后。近年来基因疫苗被运用在肿瘤的防治研究上,取得了较大进展,部分肿瘤基因疫苗已经进入临床试验阶段。Legumain为一种最新发现的类似天冬氨酸内肽酶的应激蛋白酶,其主要高表达在体内生长的肿瘤,以及肿瘤新生血管的内皮细胞和肿瘤基质内的TAMs中,在正常细胞不表达。因此,可做为一种有效的DNA疫苗抗原,充分诱导T细胞和体液免疫反应。本实验首先测定Legumain在肝癌荷瘤组织以及HepG2的表达,然后以C57BL/6J小鼠为研究对象,以Legumain作为HCC基因治疗靶抗原,构建融合DNA疫苗,以减毒沙门氏菌为DNA疫苗载体,以活菌免疫小鼠,观察其诱导的抗肿瘤效应及其免疫应答机制。方法:1. hLegumain在肝癌HepG2细胞和小鼠荷瘤组织中的表达,用免疫细胞化学及RT-PCR方法鉴定HepG2细胞的hLegumain表达。给鼠皮下注射HepG2细胞株,肿瘤组织在肿瘤细胞接种10～14天后收
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