低氧对系统性硬皮病患者皮肤成纤维细胞胶原蛋白合成及胶原基因表达的影响

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系统性硬皮病患者成纤维细胞合成胶原增多,引起皮肤硬化和内脏器官纤维化.已有文献显示,低氧状态下,正常人成纤维细胞生长加快,合成胶原增多.但缺氧能否引起系统性硬皮病患者皮肤成纤维细胞合成胶原蛋白增加,胶原基因表达增强,进而加重患者皮肤硬化和内脏器官纤维化尚未见文献报道.目的:研究低氧对系统性硬皮病患者和正常皮肤成纤维细胞胶原蛋白合成及胶原基因表达的影响.方法:1.以组织块培养法建立5个系统性硬皮病患者和5个正常皮肤成纤维细胞系;2.将成纤维细胞分别放入20%正常氧分压和2%的低氧分压环境中培养,分别于放入的第3天和第6天.用分光光度仪测定细胞培养基上清液中羟脯氨酸含量并折算成胶原蛋白含量;3.将SSc患者和正常皮肤成纤维细胞分别在20%正常氧分压和2%低氧分压环境中培养3天,用TRIzol提取细胞总RNA,用RT-PCR方法测定其中Ⅰ型和Ⅲ型胶原基因的表达.结论:低氧状态下,无论是正常皮肤还是系统性硬皮病患者皮肤成纤维细胞胶原蛋白合成均有增加,Ⅰ型和Ⅲ型胶原基因表达也均增加,低氧可能是加重系统性硬皮病患者皮肤硬化的一个重要因素.
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