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近年来，苹果树腐烂病在我国各个苹果种植区普遍发生，严重威胁到苹果产业的可持续发展。为了揭示苹果树腐烂病的致病机理，从而为有效减少病害的发生提供理论依据，本试验借助西北农林科技大学国家早区作物逆境生物学国家重点实验室前期已经建立的苹果树腐烂病菌ATMT突变体库，采用离体枝条法，对苹果树腐烂病菌的T-DNA插入突变体库中的150个突变体进行了致病力测定，经过3次筛选得到了3个致病力明显减弱的突变体，并通过基因组重测序的方法获得致病相关基因，并且对该基因的相关功能进行了初步研究。论文主要结果如下: 1.采用离体枝条法对随机选取的150株T-DNA插入突变体进行表型以及致病力的测定，经过3次重复试验，与原始菌株03-8相比，筛选得到3株致病力明显减弱的突变体，编号分别为X4379、X4368和X4468。11株菌落颜色发生了显著变化，其中突变体X4132、X4356和X4571菌落正面背面均为褐色;突变体X4281、X4263、X4416、X4288、X4375、X4573、X4392和X4625菌落正面灰白色，背面灰褐色;突变体X4379菌落正面背面均为黄褐色。11株突变体的气生菌丝稀疏。 2.选取编号为X4379的突变体进行基因组重测序，测序结果显示该突变体有两个插入位点，分别是锌指蛋白转录因子3（Vmzfp3）和跨膜蛋白42（Vmtme42）。对这两个基因分别进行基因敲除。利用Double-joint PCR构建基因敲除载体，通过PEG介导的原生质体转化方法对Vmzfp3和Vmtme42两个基因进行敲除，分别获得了135和67个突变体，再对突变体进行PCR及Southern Blot检测，得到真正的基因缺失突变体各1个。 3.对两个基因的敲除突变体分别进行表型以及致病力的测定，研究结果显示，与原始菌株03-8相比，Vmtme42的敲除突变体在菌落形态、菌落生长速度以及致病力方面均没有明显差异。Vmzfp3的敲除突变体，菌落生长速度明显减慢，菌丝稀疏，枝条的致病力明显减弱，这说明Vmzfp3可能参与腐烂病菌的生长发育。 4.经过基因功能的回复验证，Vmzfp3的回复突变体表型以及致病力均回复到了野生型03-8的水平，表明该基因与苹果树腐烂病菌的致病性密切相关。