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背景：肾细胞癌是泌尿系统常见的恶性肿瘤，发病率高居泌尿系统肿瘤的第二位，近年来，肾细胞癌的发病率和死亡率均有明显上升趋势，严重威胁着人类的健康和生命。目前的治疗仍以根治性手术为主，但术后的复发率达20％以上，且放疗、化疗的效果均不佳，因此寻找更有效的治疗手段仍是目前肾细胞癌研究的重点之一。组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors，HDACi)是近年来发现的一类新的靶向抗肿瘤药物，它主要通过调节组蛋白的乙酰化状态来改变染色质结构，进而引起相关基因，包括一些抑癌基因的转录表达，抑制肿瘤细胞增殖、诱导分化和凋亡。曲古菌素A(trichostatin A，TSA)来源自链霉菌的代谢产物，作为组蛋白去乙酰化酶抑制剂的代表药物之一，TSA已被证明对多种人类肿瘤具有显著的抑制作用，但迄今为止，TSA抗肿瘤的作用机制尚不完全清楚。
目的：观察TSA体外对人肾细胞癌Caki—1细胞生长情况、乙酰化组蛋白H3、Survivin蛋白以及p21cip1/waf1mRNA表达的影响，并探讨其可能的相关作用机制。
方法：1．采用四甲基偶氮唑蓝(methyl thiazolyl terazolium，MTT)比色法测定经0．2、0．4、0．8umol/L的TSA分别作用12、24、48、72h后对Caki—1细胞生长活性的影响，并于倒置显微镜下观察0．4umol/L的TSA处理12、24、48、72h后Caki—1细胞的形态变化。2—蛋白质印迹法检测0．4umol/L的TSA处理12、24h后Caki—1细胞乙酰化组蛋白H3、Survivin蛋白表达水平的变化。3．实时荧光定量PCR检测0．4umol/L的TSA处理12、24h后Caki—1细胞p21cip1/waf1 mRNA表达水平的变化。
结果：1．MTT结果显示TSA能显著抑制Caki—1细胞的生长，生长抑制率随处理浓度和时间的增加明显上升，呈明显的剂量、时间依赖性。同一浓度组，不同时间段的生长抑制率比较差异有统计学意义(P<0．05)；同一时间段，不同浓度组的生长抑制率比较差异有统计学意义(P<0．05)。倒置显微镜下可见TSA处理后，Caki—1细胞形态发生改变，并随作用时间的延长更加明显。2．蛋白免疫印迹结果显示，TSA能提高Caki—1细胞乙酰化组蛋白H3的表达，下调Survivin蛋白的表达。给予0．4umol/L的TSA处理Caki—1细胞，12h后Caki—1细胞的乙酰化组蛋白H3的表达水平比对照组明显提高，24h后进一步提高；而Survivin蛋白的表达12h后比对照组明显下降，24h后进一步下降。3．实时荧光定量PCR结果显示，TSA能促进Caki—1细胞p21cip1/waf1 mRNA表达。给予0．4umol/L的TSA处理Caki—1细胞，Caki—1细胞p21cip1/waf1mRNA的表达水平12h后明显升高，24h后进一步升高，达到对照组的9倍多，各组间比较差异均有统计学意义(P<0．05)。
结论：1．TSA能显著抑制Caki—1细胞的生长，呈明显的剂量、时间依赖性，并且TSA作用后，Caki—1细胞形态发生改变。2．TSA能提高Caki—1细胞乙酰化组蛋白H3的表达，下调Survivin蛋白的表达。3．TSA能促进Caki—1细胞p21cip1/waf1 mRNA表达。4．TSA对人肾细胞癌Caki—1细胞的生长抑制作用可能与其提高乙酰化组蛋白H3的水平，下调Survivin蛋白的表达，促进p21cip1/waf1 mRNA的表达有关。