【摘 要】
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目的:(1)对扁担藤不同极性部位提取物的抗炎作用和作用机制进行研究,筛选抗炎活性部位并探讨其抗炎作用机制。(2)不同产地扁担藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位抗炎作用比较的研究。(3)建立扁担藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位HPLC指纹图谱。(4)建立扁担藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位谱效关系。(5)对扁担藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位进行红外光谱及薄层定性鉴别。方法:(1)对扁担藤70%乙醇浓缩液进行小鼠急性毒性实验
【基金项目】
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广西自然科学基金项目(2017GXNSFM198368);
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目的:(1)对扁担藤不同极性部位提取物的抗炎作用和作用机制进行研究,筛选抗炎活性部位并探讨其抗炎作用机制。(2)不同产地扁担藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位抗炎作用比较的研究。(3)建立扁担藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位HPLC指纹图谱。(4)建立扁担藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位谱效关系。(5)对扁担藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位进行红外光谱及薄层定性鉴别。方法:(1)对扁担藤70%乙醇浓缩液进行小鼠急性毒性实验,测定其最大耐受量;采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、棉球肉芽肿炎症模型观察扁担藤石油醚部位、乙酸乙酯部位、正丁醇部位、95%乙醇部位、水部位提取物对急、慢性炎症的影响;采用ELISA双抗夹心法,分别按照PGE2、TNF-α、IL-6、IL-1β试剂盒说明,检测棉球肉芽肿炎症小鼠的PGE2、TNF-α、IL-6、IL-1β含量,探讨其抗炎作用机制。(2)采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀、棉球肉芽肿炎症模型观察十批不同产地扁担藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位提取物对急、慢性炎症的影响。(3)采用HPLC法对10批不同产地扁担藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位进行指纹图谱的比较分析。(4)利用灰色关联度法、最小偏二乘回归法建立扁担藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位谱效关系。(5)参照2015年版《中国药典》通则对扁担藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位进行红外光谱和薄层色谱定性鉴别。结果:(1)小鼠最大耐受量为扁担藤醇提取物浸膏剂量28g/kg,换算为生药剂量一共是183.01 g/kg;扁担藤乙酸乙酯部位中、低剂量组、正丁醇部位高剂量组和水部位高剂量组能降低小鼠耳肿胀度(P<0.05、P<0.01);扁担藤石油醚部位低、中、高剂量组、乙酸乙酯部位低剂量组、正丁醇部位低、高剂量组和水部位低剂量组能降低小鼠棉球肉芽肿重(P<0.05、P<0.01);扁担藤乙酸乙酯、正丁醇部位提取物组的TNF-α、PGE2、IL-6、IL-1β的含量均有减少(P<0.05、P<0.01)。(2)各个产地扁担藤乙酸乙酯、正丁醇部位提取物对二甲苯致小鼠耳廓肿胀、小鼠棉球肉芽肿炎症模型均有抑制作用(P<0.05、P<0.01)。(3)建立了扁担藤乙酸乙酯部位指纹图谱,标定了13个共有峰,指认了2号峰为原儿茶酸,不同产地扁担藤乙酸乙酯部位相似度均在0.8以上;建立了扁担藤正丁醇部位指纹图谱,标定了13个共有峰,指认了5号峰为原儿茶酸,不同产地扁担藤正丁醇部位相似度均在0.7以上。(4)扁担藤乙酸乙酯部位5个色谱峰与抑制小鼠耳廓肿胀有相关性,3个色谱峰与抑制小鼠肉芽肿有一定的相关性;扁担藤正丁醇部位1个色谱峰与抑制小鼠耳廓肿胀有相关性,4个色谱峰与抑制小鼠肉芽肿有一定的相关性,其中6号色谱峰对这两个药理效应具有显著的相关性。(5)确定了扁担藤乙酸乙酯部位和正丁醇部位薄层色谱鉴别和红外光谱的方法。结论:(1)扁担藤醇提物无明显急性中毒作用;扁担藤石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、水部位提取物均有抗炎作用;综合急性、慢性炎症模型实验结果,扁担藤醇提取物乙酸乙酯部位提取物低剂量和正丁醇部位提取物高剂量具有较好抗炎活性,为扁担藤抗炎活性部位;扁担藤乙酸乙酯部位抗炎作用机制主要与抑制致炎介质IL-1β的生成有关,正丁醇部位抗炎作用机制主要与抑制致炎介质PGE2,IL-6,IL-1β的生成有关。(2)不同产地扁担藤乙酸乙酯、正丁醇部位提取物对急、慢性炎症均有一定的抑制作用,但抗炎作用强弱有所不同,有一定的差异。(3)十批不同产地扁担藤乙酸乙酯部位、正丁醇部位的指纹图谱之间均有较好的相似性,两个极性部位均指认出原儿茶酸,充分表明了原儿茶酸为扁担藤药材重要的有效成分。(4)扁担藤不同极性部位由多种成分协同产生抗炎作用。(5)根据薄层色谱和红外光谱的定性鉴别研究初步对扁担藤乙酸乙酯部位和正丁醇部位质量进行分析,可以为今后的质量控制以及质量标准的制定提供科学依据。
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