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背景:HCC(Hepatocellular Carcinoma,HCC)是一种最常见的严重威胁人类健康的恶性肿瘤。对高危人群筛查困难和HCC早期诊断率低是严重制约HCC治疗水平提高的重要因素。而目前临床上广泛应用的HCC血清学诊断指标并不能有效地改善目前的HCC诊治困境。近期研究表明Epidermal growth factor-like domain 7(Egfl7)可能与HCC这类富血管肿瘤的肿瘤新生血管形成有关。作为一种分泌型蛋白很可能成为新的HCC血清学诊断标志物。目的:建立血清Egfl7的双抗体夹心ELISA检测方法,研究其可否作为新的HCC血清标志物,并通过其与血清AFP联合分析,评价其对于高危人群筛查和HCC早期诊断及鉴别诊断的效能。方法:参照酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked ImmunosorbentAssay,ELISA)的基本原理,我们建立了血清Egfl7的检测方法,即采用以鼠源性单克隆抗体和山羊源性多克隆抗体为基础的双抗体夹心ELISA法来检测血清样本中Egfl7。本研究在随机双盲的原则下共检测了131例HCC、120例慢性肝病(包括慢性病毒性肝炎、肝硬化和门静脉高压症)患者和382例健康人血清样本中Egfl7含量。同时收集和检测了HCC组、慢性肝病组和健康人组血清AFP含量。结果:血清Egfl7检测方法的质量控制分析提示批内差异、批间差异和干扰实验的变异系数(Coefficient of Variation,CV)分别＜5%、＞15%和＜10%。HCC组、慢性肝病患者组和健康人组样本血清AFP和血清Egfl7含量均有统计学差异(135.56ng/mL vs.12.30ng/mL vs.1.52ng/mL,3891.67ng/mL vs.1600.28ng/mL vs.1088.83ng/mL,P＜0.05)。制定血清Egfl7的诊断阈值为2620.00 ng/mL,血清AFP诊断阈值为20.00 ng/mL。结果提示AFP阴性患者中Egfl7阳性的检出率为67.3%。在普通人群中HCC的诊断方面,血清Egfl7与AFP的灵敏度分别为(74.8%vs.60.3%,P＜0.05),特异度分别为(81.2%vs.96.9%,P＜0.05),曲线下面积为(0.840 vs.0.881,P＞0.05)。在高危人群的筛查方面,Egfl7的灵敏度、特异度和正确率均高于AFP(74.8%vs.60.3%,71.7%vs.58.3%,73.3%vs.59.4%,P＜0.05)。结论:本研究首次建立了稳定可靠的,可用于血清Egfl7检测的双抗体夹心ELISA法。在普通人群的HCC诊断方面,血清Egfl7的灵敏度高于AFP,而特异度稍逊于后者。通过检测血清Egfl7有助于AFP阴性的HCC患者的诊断,可减少HCC的漏诊。在高危人群的筛查和预警方面,血清Egfl7有助于改善HCC早期诊断率低,预警困难的现状。总之,血清Egfl7是一个全新的,可用于HCC诊断的血清学诊断标志物。