不同剂量布地奈德对哮喘大鼠肺组织Bcl-2、Bax和p-ERK1/2表达影响的实验研究

来源 :南昌大学医学院 南昌大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:hzxy05jsjb
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目的:1.研究哮喘大鼠肺组织中凋亡相关基因Bcl-2、Bax和磷酸化的细胞外信号调节激酶1/2(p-ERK1/2)的表达及相互关系;  2.探讨雾化吸入不同剂量布地奈德(BUD)对哮喘大鼠肺组织病理改变和Bcl-2、Bax和p-ERK1/2表达及Bcl-2/Bax比值的影响。  方法:1.5~6周龄,健康SD大鼠,体重130~160g,随机分为正常对照组(对照组)、哮喘模型组(哮喘组)、BUD隔日干预组(干预组I)、BUD每日干预组(干预组II),每组均分10只;哮喘组、所有干预组于第1、14天分别给予卵清蛋白(OVA)致敏液腹腔内注射致敏,第16天开始将SD大鼠放置于自制的半封闭的透明容器内,给予OVA雾化激发,每次30分钟,隔日1次,至8周。所有干预组第16天开始给予BUD1mg雾化,干预组I隔日1次,干预组II每日1次,对照组由生理盐水替代。  2.采取HE染色法观察肺组织的病理改变,免疫组化法检测Bcl-2、Bax、p-ERK1/2各指标的在肺组织中表达。采用直线相关分析Bcl-2、Bax、Bcl-2/Bax与 p-ERK1/2的相关性。  3.400倍高倍镜下,每张切片取4个视野,通过Image Pro Plus图像分析软件测定Bcl-2、Bax、p-ERK1/2累积光密度(IOD)值,算其平均值。  结果:1.肺组织病理改变:哮喘组:气管管腔狭窄变形,黏膜明显水肿,上皮细胞大量增生、脱落,黏液分泌明显增多,支气管平滑肌增生肥厚,大量炎性细胞浸润。干预组病理改变较哮喘明显减轻,干预组II病理改变较干预I组减轻。  2.各组Bcl-2表达的相互比较:与对照组比较,哮喘组Bcl-2表达明显升高,所有干预组Bcl-2表达均较哮喘组降低,有显著差异(P<0.01);干预组II降低较干预组I更明显,有显著差异(P<0.01),但两组仍高于对照组,有显著差异(P<0.01)。  3.各组Bax表达的比较:与对照组相比,哮喘组Bax表达明显降低,所有干预组Bax表达均较哮喘组升高,有显著差异(P<0.01);干预组II升高较干预组I更明显,有显著差异(P<0.01),但两组仍低于对照组,有显著差异(P<0.01)。  4.各组Bcl-2/Bax比值的比较:与对照组相比,哮喘组Bcl-2/Bax比值明显升高有显著差异(P<0.01),干预组I Bcl-2/Bax比值明显升高,有显著差异(P<0.01),干预组II Bcl-2/Bax比值无明显升高,无显著差异(P>0.05)。所有干预组Bcl-2/Bax比值均较哮喘组降低,有显著差异(P<0.01);干预组II降低较干预组I更明显,有显著差异(P<0.01)。  5.各组p-ERK1/2表达的比较:与对照组相比,哮喘组p-ERK1/2表达明显升高,干预组p-ERK1/2表达较哮喘组降低,有显著差异( P<0.01);干预组II降低较干预组I明显,有显著差异(P<0.01),但两组仍高于对照组,有显著差异(P<0.01)。  6.哮喘组Bcl-2、Bax、Bcl-2/Bax与p-ERK1/2相关性分析:Bcl-2、Bcl-2/Bax与p-ERK1/2表达呈正相关(r=0.658,0.716,P<0.05),Bax与p-ERK1/2表达呈负相关(r=-0.665,P<0.05),均具有统计学意义。  结论:1、哮喘大鼠肺组织中Bcl-2、Bcl-2/Bax、p- ERK1/2表达显著升高, Bax表达降低,提示Bcl-2、Bax、p-ERK1/2可能在支气管哮喘的气道炎症、气道重塑过程中起重要作用,且三者之间有密切关联。  2、雾化吸入BUD可减轻哮喘的病理改变,降低Bcl-2、Bcl-2/Bax、p-ERK1/2和升高Bax表达,可能是其减轻气道炎症、改善气道重塑的机制之一,每日雾化比隔日雾化作用更显著。  3、隔日及每日雾化吸入BUD,Bcl-2、Bax、p-ERK1/2的表达均不能恢复正常,提示可能需要较长时间或适当增加雾化吸入频率来控制气道炎症,或者寻找新的作用靶点进行实验研究。
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