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本文从以下几部分进行论述： 第一部分 调节性T细胞在SLE患者外周血数量变化的研究 背景： 系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus，SLE)是一种累及全身多脏器的自身免疫性疾病，迄今为止其病因和发病机制尚不十分清楚，目前研究认为其发病主要与体内免疫耐受失衡相关。调节性T细胞（RegulatoryT cells，Treg）是一类抑制体内自身免疫反应的T细胞亚群，作为免疫耐受的重要调节者，在维持机体免疫耐受中发挥重要作用。总结近年来研究发现，在SLE疾病状态下，患者外周血Treg数目的研究结果并不是完全一致，有些患者与健康人相比体内Treg水平明显上升，有些则无明显差异。 目的： 本研究旨在研究SLE疾病患者外周血中不同定义Treg细胞数量，包括CD4+CD25+FOXP3+Treg细胞、CD4+FOXP3+Treg细胞、CD4+CD25+CD127-Treg细胞，探讨其与疾病活动度之间的关系。 方法： 首先进行了meta分析：计算机检索PubMed和EMBASE数据库，纳入文献中Treg比例以均数±标准差(mean±SD)方式表示，运用Stata14.0进行分析，并进一步将纳入文献按人种及Treg的不同定义进行亚组分析。鉴于SLE患者活动期与非活动期Treg的研究样本量较少，Treg的定义不统一，及Treg在PBMC和CD4+T细胞中比例变化存在争议，本实验加大了样本量，采用Treg公认的三种定义：CD4+CD25+CD127-、CD4+FOXP3+、CD4+CD25+FOXP3+，流式细胞术检测了活动期、非活动期SLE患者以及HC的外周血Treg绝对数、Treg占PBMC以及占CD4+T细胞的比例，并将不同定的Treg与SLE疾病活动度进行相关性分析。 结果： Meta分析提示，与HC相比，SLE患者外周血Treg占PBMC的比例明显降低，进一步分析发现，亚洲人种及CD4+CD25+FOXP3+和CD4+FOXP3+定义的Treg在PBMC中的比例明显降低；而Treg占CD4+T细胞的比例相比HC无明显差异，活动期和非活动期患者Treg占PBMC及占CD4+T细胞比例亦无明显差异。进一步运用流式细胞术分析了活动期与非活动期SLE患者外周血三种不同定义的Treg绝对数以及其在PBMC和CD4+T细胞中的比例后发现，SLE患者三种不同定义的Treg绝对数及在PBMC中的比例均明显低于HC。其中活动期SLE患者CD4+CD25+CD127-标记的Treg绝对数及在PBMC中的比例明显低于非活动期患者，且与SLE活动度评分(SLE disease activityindex，SLEDAI)明显负相关；而活动期SLE患者CD4+CD25+FOXP3+和CD4+FOXP3+定义的Treg占CD4+T细胞的比例明显高于非活动期患者，其与SLEDAI评分正相关。 结论： 与meta分析结果一致，SLE患者外周血Treg占PBMC的比例明显降低，其中CD4+CD25+CD127-定义的Treg可以很好地反映SLE疾病状态。而Treg占CD4+T细胞的比例尚无一致性结论，有待进一步深入研究。 第二部分 鞘磷脂合成酶1对SLE样小鼠CD4+T细胞亚群的影响 背景： 鞘磷脂(Sphingomyelin，SM)是脂质筏主要组成部分，可以参与体内多种疾病的发生。鞘磷脂合成酶I(Sphingomyelin synthase1，SMSl)是SM合成的最后一步关键酶。研究发现，SMSI敲除引起SM缺陷，可以抑制CD4+T细胞亚群活化，对刀豆蛋白A(Concanavalin，ConA)诱导肝脏炎性损伤模型有保护作用。而SLE患者CD4+T细胞亚群比例失调，可导致SLE免疫调节功能紊乱。我们推测SMSI也可能通过影响CD4+T细胞分群，参与SLE疾病的进程。本研究拟探索SMSI对SLE疾病进展中CD4+T细胞分群的影响。慢性移植物抗宿主病(chronic graft-versus-host disease，cGVHD)模型是通过注射异种来源的淋巴细胞诱导机体高滴度自身抗体产生以及免疫调节功能异常，常常也被认为是研究SLE的理想动物模型之一。 目的： 探讨SMSI对cGVHD小鼠体内CD4+T细胞亚群变化的影响。 方法： 1．采用bm12诱导的cGVHD小鼠模型模拟SLE样病变，将SMSI-／-和WT小鼠分别诱导造模； 2．在造模4W时，分别检测模型小鼠血清抗核抗体(Anti-nuclear antibosy，ANA)和24h尿蛋白水平； 3．流式细胞术检测模型小鼠辅助性T细胞(helper T cells，Th)亚群及Treg比例。 结果： 造模4W后，野生型(wild type，WT)小鼠ANA、24h尿蛋白明显升高；相比WT小鼠，SMSI敲除的模型鼠ANA、尿蛋白/Cr比值均下降，脾脏中Thl、Th2、Treg比例、Thl/Th2下降，而淋巴结中仅有Thl比例下降。 结论： 通过SMSI基因敲除下调SMSI表达后，cGVHD SLE样小鼠脾脏CD4+T细胞亚群比例明显减少，自身抗体水平以及24h尿蛋白水平明显降低，这一现象提示SMSI参与了SLE样小鼠肾脏病变过程，这可能与SMSI影响CD4+T细胞的亚群比例有关，其确切机制尚需进一步研究阐明。