BDA示踪脊髓损伤大鼠下行神经传导通路的实验研究

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目的:使用生物素葡聚糖胺(BDA)示踪观察大鼠脊髓损伤下行传导通路的改变。方法:采用清洁雌性SD大鼠28只,随机分为实验对照组(6只)和脊髓腹侧损伤15g、30g、50g3个小组(每组6-8只),使用标准化脊髓损伤动物模型实验装置制备动物模型,损伤部位选择在T10-T11水平压迫脊髓腹侧,对照组大鼠仅咬除棘突和椎板,不损伤脊髓。术后12小时、96小时,采用改良的Tarlov分级评分、斜板实验及BBB评分评价实验动物的运动功能,所有大鼠立体定向开颅,BDA注射于大脑皮层。BDA注射2周后取出损伤节段以下脊髓组织,行BDA染色成像。统计学方法根据所得数据方差齐性检验结果采用双因素方差分析或秩和检验。结果:BDA神经示踪经过免疫组化显色后BDA阳性的神经元呈棕褐色深染,且随着损伤外力的加大,阳性神经元数量明显减少,脊髓损伤组较对照组相比大鼠T12-L1平面平均积分光密度IOD明显降低,有显著性差异。脊髓损伤组大鼠改良的Tarlov分级评分、斜板实验及BBB评分均明显低于对照组(p<0.05);增加砝码质量,腹侧损伤组大鼠受到的向上提拉的力量增大,双下肢改良的Tarlov分级评分逐渐下降,大鼠斜板实验临界角逐渐下降,BBB评分呈降低趋势。结论:(1)BDA神经示踪可以良好的显示大鼠脊髓损伤神经通路上神经元的变化。从而为脊髓损伤及修复过程中神经通路改变提供可靠的形态学依据;(2)改良BDA的注射和染色技术,可以有效的避免BDA的漏损,提高显像质量;(3)脊髓腹侧损伤临床结局转归与脊髓所受冲量有关,受损后大脑神经中枢下行传导通路异常程度越重,其造成的功能障碍程度也越重。
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