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背景:脓毒症是一个世界性的严重临床病症,《第三版脓毒症与感染性休克定义国际共识》将其定义为由于宿主对感染应答失调所导致的威胁生命的多器官功能衰竭,其幸存患者往往存在一定程度的身体、心理以及认知障碍,且后期的死亡风险显著增加。目前,人们已经认识到肠道微生态对机体健康极为重要,在疾病预后等方面也扮演重要角色,改善肠道微生态有利于患者预后。但是脓毒症治疗过程中,医疗介入尤其是抗生素使用常会破坏肠道稳态,而肠道微生态紊乱也可诱发脓毒症。近些年,中医认为肠道微生态理论与中医存在很多异曲同工之处,并且一些传统的中药复方在治疗疾病的同时可以调理肠道微生态,这引起人们的极大关注,但是相关的深度测序数据甚少。目的:该研究旨在探讨广谱抗生素、益生菌、清热解毒方剂对实验性脓毒症大鼠的治疗效果,并对比三种治疗用药在短期内对肠道微生态的作用特点,为药物对肠道菌群方面的作用或副作用研究提供一定的数据基础。方法:将健康雄性Wistar大鼠随机分为假手术组(Z组,n=12)和脓毒症模型组(n=98),后者采用盲肠结扎穿孔法(Cecal ligation and puncture,CLP)制备大鼠脓毒症模型,然后随机分为治疗对照组(S组)、抗生素组(P组)、益生菌组(Y组)、清热解毒方剂组(D组)。完成手术6 h后,依次给予Z组、S组、P组、Y组以及D组无菌蒸馏水、无菌蒸馏水、抗生素、益生菌、清热解毒方剂灌胃,每天一次,连续三天。观察各组大鼠术后72 h内的存活情况,并及时采集S组术后72 h内死亡大鼠以及其他组术后72 h时幸存大鼠的盲肠基部内容物。采用16S rDNA V3测序分析肠道微生物群,同时利用高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱分析内容中代谢物轮廓。结果:1.Z组、S组、P组、Y组及D组大鼠72 h存活率依次是100.00%、26.67%、100.00%、58.33%、88.24%。三个治疗组(P组、Y组、D组)大鼠的存活率显著高于S组(P=0.000;P=0.010;P=0.000);D组与P组的大鼠存活率无显著差异(P=0.335),且均显著高于Y组(P=0.039;P=0.008)。2.16S rDNA V3测序数据α多样性分析显示:S组肠道菌群多样性与Z组无显著差异,Y组与D组肠道菌群多样性较S组变化不显著,但较Z组显著降低,而P组肠道菌群多样性较其他组均显著降低。3.肠道菌群的群落分析结果显示:各组样本有分别聚集的趋势;P组、Y组以及D组均与Z组和S组有显著差异,但是Y组、D组与Z组和S组的差异相对P组与其他组间的差异小。4.五组大鼠肠道内容物中优势菌门均为Firmicutes、Bacteroidetes以及Proteobacteria。S组、P组、Y组以及D组的Firmicutes相对丰度较Z组显著降低。S组、Y组以及D组的Bacteroidetes相对丰度显著高于Z组,而在P组中明显降低。Proteobacteria相对丰度在Y组、D组、S组三组间无显著差异,但在D组中高于Z组;在P组中相对丰度高达75.6%,较其他组均显著升高。5.我们对不同组大鼠肠道内容物中隶属于Proteobacteria的菌在属水平进行差异分析,发现S组中Escherichia-Shigella、Helicobacter、Morganella、Proteus以及Thalassospira相对丰度均显著高于Z组,而Z组仅Desulfovibrio相对丰度高于S组;P组中Enterobacter、Escherichia-Shigella、Klebsiella、Morganella、Proteus、Pseudomonas相对丰度显著高于S组,而Bilophila、Desulfovibrio、Helicobacter、Thalassospira相对丰度较S组减低;Y组与S组相比,仅Desulfovibrio相对丰度上升,而Morganella和Thalassospira相对丰度下降;D组与S组相比,Candidatus Hepatincola、Desulfovibrio、Klebsiella、Parasutterella、Psychrobacter相对丰度升高,而Proteus和Thalassospira相对丰度降低;D组中Bilophila、Candidatus Hepatincola、Desulfovibrio、Helicobacter、Sutterella相对丰度较P组升高,而Enterobacter、Escherichia-Shigella、Morganella、Proteus以及Pseudomonas等相对丰度显著下降,尤其是Escherichia-Shigella由41.1%降至3.8%。6.肠道菌群代谢物轮廓分析显示,S组与Z组存在显著差异,P组代谢轮廓发生显著改变,D组代谢轮廓改变较P组小,而Y组与Z组最为接近。结论:抗生素、益生菌以及清热解毒方剂治疗实验性脓毒症大鼠均效果显著,尤其是清热解毒方剂和抗生素。但是抗生素治疗脓毒症的同时加重大鼠肠道菌群紊乱显著,代谢谱发生显著改变,而清热解毒方剂治疗对大鼠肠道微生态影响较抗生素小。