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1.研究目的经方大黄甘草汤出自《金匮要略》,经历代传承,临床应用广泛,且通便止呕的药效肯定。目前,对于该方的药效组分的研究甚少,无法从药效物质方面对大黄甘草汤进行质量控制。本研究是在传统中医药配伍理论及中药药效组分理论指导下,研究经方大黄甘草汤的药效组分,并分析其药效组分与配伍之间的对应关系,为中药复方探索“配伍—药效组分”关系提供实验支撑,为进一步建立大黄甘草汤与疗效对应的药效组分质量评价体系奠定基础,并为中药药效组分学和组分鉴定学的完善提供科学依据。2.研究方法及内容本文以大黄甘草汤（《金匮要略》）为研究对象,通过检索文献,整理大黄甘草汤及其配伍饮片生大黄、生甘草中与功能主治相对应的化学成分和药理活性,筛选出大黄甘草汤中符合剂型特点、药理活性明确,且与其通便止呕药效相关的药效组分作为分析的标准物质。以经方中的单味药、配伍饮片及配伍比例变换的各衍生方做比较,按经方汤剂的剂型制备供试品,采用HPLC-DAD多波长组分测定法对大黄甘草汤中与药效相关的12种药效组分番泻苷B-番泻苷A-芦荟大黄素-大黄酸-大黄素-大黄酚-大黄素甲醚-甘草苷-异甘草苷-甘草素-异甘草素-甘草酸的含量进行测定,分析大黄甘草汤通便止呕的药效组分随配伍发生的含量及比例的变化规律,同时进一步分析其配伍对药效组分的影响。研究内容包括:①十个不同批次生大黄及生甘草药效组分的测定及分析;②大黄甘草汤与其配伍饮片的药效组分相关性分析;③大黄甘草汤配伍饮片对药效组分的影响;④单因素生甘草剂量改变对大黄甘草汤药效组分影响的分析;⑤单因素生大黄剂量改变对大黄甘草汤药效组分影响的分析。3.研究结果（1）十个不同批次的商品生大黄及生甘草药效组分的含量及比例均具有明显差异,结果具有统计学意义（P<0.05）。十批生大黄7种药效组分总量的范围为（μg/g）:1300.00±2.10～3477.90±4.78,这7种药效组分比例的趋势相近,均为大黄酸的含量最高,大黄素甲醚的含量最低。十批甘草5种药效组分总量的范围为（μg/g）:10038.72±43.57～19656.93±7.66,这5种含量比例趋势相近,含量均为甘草酸>甘草苷>异甘草苷>甘草素>异甘草素。（2）大黄和甘草配伍使用后,其药效组分含量及比例变化明显（P<0.05）,二蒽酮类成分含量明显降低,游离蒽醌类成分含量变化较不明显,甘草酸及甘草黄酮类成分的含量均有不同程度降低。由产自山西的生大黄（批次150204）及产自内蒙的生甘草（批次150204）配伍成的大黄甘草汤通便止呕的药效组分为（μg/mL,以供试品溶液中含量计）:番泻苷 B（2.490-±0.013）-甘草苷（25.161±0.316）-番泻苷 A（3.453±0.105）-异甘草苷（2.305±0.069）-甘草素（4.922±0.044）-异甘草素（0.308±0.003）-芦荟大黄素（4.281±0.103）-甘草酸（36.469±0.251）-大黄酸（22.212±0.272）-大黄素（3.877±0.020）-大黄酚（2.664±0.043）-大黄素甲醚。（3）配伍比例固定为大黄:甘草12g:3g,配伍饮片改变时,大黄甘草汤中大黄药效组分、甘草药效组分及12种药效组分总量均发生了明显变化（P<0.05）,其中药效组分总量的变化规律为:生大黄:生甘草>生大黄:炙甘草>熟大黄:生甘草>酒大黄:生甘草>熟大黄:炙甘草>大黄炭:生甘草>酒大黄:炙甘草>大黄炭:炙甘草。各配伍饮片对药效组分的影响程度为:生大黄>熟大黄>酒大黄>大黄炭;生甘草>炙甘草。（4）单因素生甘草配伍剂量改变时,大黄甘草汤中大黄药效组分、甘草药效组分及大黄甘草汤药效组分总量均发生明显改变（P<0.05）。生大黄配伍剂量12g不变,生甘草配伍剂量分别为0.1g,0.3g,1g,3g,6g,9g,12g时,大黄与甘草的配伍比例从120:1变为1:1,大黄甘草汤中12种药效组分的总量依次为（μg/g）:2259.49±7.49,2870.58±0.14,4034.58±7.74,5475.56±32.00,8541.69±3.42,10370.45±6.72,10707.21±13.98。生甘草配伍剂量增加时,大黄药效组分的含量随之降低,大黄甘草汤药效组分总量随之增加。（5）单因素生大黄配伍剂量改变时,汤剂中大黄药效组分、甘草药效组分及大黄甘草汤药效组分总量也都发生了明显变化（P<0.05）。生甘草配伍剂量3g保持不变,生大黄配伍剂量分别为3g,6g,9g,12g,15g,18g,21g时,大黄与甘草的配伍比例从1:1变为7:1,大黄甘草汤中12种药效组分的总量依次为（μg/g）:10871.94±0.19,8831.31±1.57,7205.46±8.77,5475.56±32.00,5296.45±21.05,5118.08±7.11,4606.44±11.42。生大黄配伍剂量增加时,甘草药效组分的含量随之降低,大黄甘草汤药效组分总量随之降低。4.结论与讨论（1）本研究建立了经方大黄甘草汤及其配伍饮片中与其通便止呕功效相关的12种药效组分（番泻苷B-番泻苷A-芦荟大黄素-大黄酸-大黄素-大黄酚-大黄素甲醚,甘草苷-异甘草苷-甘草素-异甘草素-甘草酸）的HPLC-DAD多波长组分测定方法,结果重现性好、操作方法简便、专属性强,用于大黄甘草汤的质量控制具有科学性和可行性。（2）不同批次的大黄及甘草的药效组分的含量及比例具有明显差异。用药效组分作为标准物质标定单味大黄、甘草及大黄甘草汤的质量,建立经方大黄甘草汤的质量标准时需要对大量的取样批次进行测定及分析,确定其药效组分的含量及比例范围。探讨大黄甘草汤药效组分与配伍之间关系时应固定选取同一批次的大黄及甘草,以排除批次间产生的干扰。配伍对大黄甘草汤的药效组分的含量、比例及总量都有显著影响。大黄甘草汤药效组分与其配伍饮片有关,大黄与甘草配伍使用后,其药效组分含量和比例变化明显,证明中药复方的药效组分不是其配伍饮片药效组分的叠加,而是配伍组分间发生了物理或化学的相互作用,改变了药效组分的溶出。配伍比例相同,配伍饮片不同时,药效组分的溶出量不同,配伍饮片为生甘草与生大黄时,药效组分含量最高,证明了经方组方的科学性。配伍饮片相同时,通过单因素法改变配伍剂量和比例,药效组分的溶出量也不同,配伍比例与药效组分间存在一一对应关系。且甘草对大黄甘草汤药效组分总量的影响强于大黄,说明甘草虽为臣药,但对大黄甘草汤药效的发挥非常重要,其作用不可忽视,另外这也有可能同药效组分的筛选不全面有关。药效组分不同时,临床疗效也会发生改变,提示中药复方在临床应用时应注意其饮片的品种、炮制品和剂量,处方及调剂时均需谨慎。中药复方的配伍组分及比例确定时,其药效组分也是确定的,也证明了用经方大黄甘草汤含量及比例确定的药效组分作为标准物质,对临床应用的大黄甘草汤进行质量评价及控制的科学性。