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狒蛛科(Theraphosidae)蜘蛛隶属于蜘蛛目(Araneae)、后纺亚目(Opisthothelae)、原蛛下目(Mygalomorphae)。全球已知有116属、920种,其中中国己记载有5属10种,主要分布在海南、广西、云南、贵州、香港、台湾。根据《濒危野生动植物国际贸易公约》(CITES),狒蛛科蜘蛛所有种均列入保护名录。我们必须保护和可持续利用该类蜘蛛资源。保护狒蛛科蜘蛛,除了要保护其栖息地外,还必须保护其遗传多样性。对其遗传多样性和亲缘关系的研究可以为开展狒蛛科蜘蛛人工养殖、濒危动物保护和利用奠定基础。
本研究采集广西和越南5个种群的施氏单蛛(Haplopelma schmidti von Wirth,1991)27头,海南省4个种群的海南单蛛(Haplopelma hainanum(Liang et al.,1999》17头,海南亚龙湾广西缨毛蛛(Chilobrachys guangxiensis(Yin& Tan,2000))4头,越南西贡柯氏捕鸟蛛(Selenocosmia kovariki(Schmidt& Krause,1995))1头。应用mt DNA COI和mt DNA D-LOOP(非编码区)两个分子标记。
用mt DNA COl测定了狒蛛科4种蜘蛛共49个个体mtDNA COI部分序列,结合GenBank Aphonopelma.sp mtDNA COI序列,并将Aphonopelma.sp做外群,采用软件ClustalX,Mega3.1,DnaSP,Paup对5种蜘蛛亲缘关系进行聚类分析。同时采用软件Arlequin2.0,分别对施氏单蛛和海南单蛛进行遗传多样性分析。获得结果如下:
1.根据遗传距离进行系统发育分析,来自广西和越南的施氏单蛛5个种群聚为一类,并和海南单蛛的4个种群聚在一起,互为姊妹群;同属棒刺蛛亚科的广西缨毛蛛和棒刺蛛属的柯氏捕鸟蛛距离较近,即这两种蜘蛛的亲缘关系较近。作为外群的Aphonopelma。sp与广西缨毛蛛演化年代较其它种蜘蛛近。
2.施氏单蛛COI测定27个序列,界定了11个单倍型,且其中存在6个共享单倍型,平均核苷酸差异数k为10.904,核苷酸多样度Pi值为0.004,单倍型多样度Hd值为0.818,施氏单蛛遗传多样性较高。AMOVA分析,85.071%的变异来自施氏单蛛种群内个体间,群体间的遗传变异为总遗传变异的16.483%,群体内和群体间的遗传变异都极显著。
3.海南单蛛COI测定的17条序列,界定了14个单倍型,3个共享单倍型。平均核苷酸差异数为66.708,核苷酸多样度Pi值为0.077,单倍型多样度Hd值为0.978,海南单蛛的遗传多样非常高。AMOVA分析,59.88%的变异来自海南单蛛种群内个体间,遗传变异是极显著的。
用mt DNA D-loop测定了狒蛛科3种蜘蛛共47个个体mtDNA D-loop全长序列,采用与mt DNA COI分析中相同软件进行分析,结果为:
1、施氏单蛛D-LOOP测定26条序列,界定了6个单倍型,5个共享单倍型,平均核苷酸差异数为1.105,核苷酸多样度Pi值为0.004,单倍型多样度Hd值为0.745。AMOVA分析57.373%的遗传变异存在于群体内个体间,38.219%的遗传变异来自4个种群间,遗传分化都是极显著的,但越南和广西两组种群之间无遗传分化现象。进一步证明,产自我国广西的种类与产自越南的种类为同种,均为施氏单蛛。施氏单蛛遗传多样性较丰富。
2、海南单蛛D-LOOP测定17条序列,界定了9个单倍型,3个共享单倍型,平均核苷酸差异数为6.15,核苷酸多样度Pi值为0.007,单倍型多样度Hd值为0.875。58.93%的变异来自海南单蛛种群内个体间,遗传变异也是显著的。